【摘 要】
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目的:观察不同剂量果王素对大鼠肺纤维化的治疗作用,检测各组大鼠肺组织中成纤维细胞生长因子（FGF）及血管内皮生长因子（VEGF）表达,探讨果王素抗肺纤维化的可能作用机制,为肺纤维化治疗提供新的思路与方法。方法:选用8周龄、清洁级的雄性Sprague-Dawley Rat（SD）大鼠128只,大鼠的体质量（210±15）g。在SPF实验条件下实施一周适应性喂养,并将其随机分为六大组,依次为空白对照组
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目的:观察不同剂量果王素对大鼠肺纤维化的治疗作用,检测各组大鼠肺组织中成纤维细胞生长因子（FGF）及血管内皮生长因子（VEGF）表达,探讨果王素抗肺纤维化的可能作用机制,为肺纤维化治疗提供新的思路与方法。方法:选用8周龄、清洁级的雄性Sprague-Dawley Rat（SD）大鼠128只,大鼠的体质量（210±15）g。在SPF实验条件下实施一周适应性喂养,并将其随机分为六大组,依次为空白对照组八只大鼠,病理模型组、泼尼松干预组、低剂量果王素干预组、中剂量果王素干预组、高剂量果王素干预组,各二十四只大鼠。给予2%的戊巴比妥钠45mg/kg腹腔注射麻醉,无菌操作下颈部正中切开,暴露气管并切开气管,除空白组外的其它各组一次性在气管内注入5mg/kg博莱霉素A5（溶于0.2ml 0.9%氯化钠溶液）,将大鼠保持直立的姿势,随后进行旋转,确保药液的均匀分布,并构建肺纤维化实验动物模型,在空白对照组一次性在气管内注入0.2ml 0.9%氯化钠,操作方式同其它组。于制模型的第二天起,空白对照组每日0.9%氯化钠2 m L灌胃1次;病理模型组于制模型第二天起,每日0.9%氯化钠2 m L灌胃1次;泼尼松干预组于制模型第二天起,每日5 mg/kg醋酸泼尼松,溶于0.9%氯化钠溶液2 ml,灌胃1次;低剂量果王素干预组、中剂量果王素干预组、高剂量果王素干预组分别于制模型第二天起,每日60 mg/kg果王素、120 mg/kg果王素、180 mg/kg果王素,溶于0.9%氯化钠溶液2 ml,灌胃1次,将空白对照组于构建肺纤维化模型后第28天全部处死,病理模型组、泼尼松干预组、低剂量果王素干预组、中剂量果王素干预组、高剂量果王素干预组于构建肺纤维化模型后第7天、14天、28天各处死8只。取大鼠的右侧肺组织进行组织形态学观察、免疫组化法,取大鼠左侧肺组织进行实时荧光定量PCR（q RT-PCR）、Western blot法对各组干预效果进行评估。本研究中所有数据均采用SPSS20.0软件处理。结果:（1）泼尼松干预组、低剂量果王素干预组及中剂量果王素干预组、高剂量果王素干预组大鼠的精神状态、饮食及活动等优于病理模型组;（2）高剂量果王素干预组干预7 d、14 d后及28 d后肺组织整体结构接近正常,肺泡结构清晰可见,出现少量的炎症细胞浸润;（3）高剂量果王素干预组干预7 d、14 d、28 d后肺泡炎评分均低于病理模型组、低剂量果王素干预组、中剂量果王素干预组（P＜0.05）。高剂量果王素干预组和泼尼松干预组肺炎评分基本一致,无统计学意义（P＞0.05）;（4）高剂量果王素干预组干预7 d、14 d、28 d后未见肺部片状坏死,肺组织结构接近正常。高剂量果王素干预7 d、14 d及28 d后胶原纤维面积低于病理模型组及低剂量果王素干预组、中剂量果王素干预组（P＜0.05）,与泼尼松干预组相比,胶原纤维面积基本一致,无统计学意义（P＞0.05）;（5）在干预7 d、14 d、28 d后,除空白对照组外,FGF在第14 d时蛋白含量最高,各组间比较,病理模型组FGF蛋白含量最高,高剂量果王素干预组FGF蛋白含量明显低于果王素中及低剂量干预组（P＜0.05）,但与泼尼松干预组基本相同,无统计学意义（P＞0.05）。除空白对照组外,VEGF在第7 d时蛋白含量最高,随着时间推移逐渐减弱,各组间相比,病理模型组VEGF蛋白含量最高,高剂量果王素干预组VEGF蛋白含量明显低于果王素中、低剂量干预组（P＜0.05）,但与泼尼松干预组基本相同,无统计学意义（P＞0.05）;（6）在病理模型组和其他干预组中,大鼠肺组织FGFm RNA的表达在14 d时最高,到28d逐步降低。VEGFm RNA的表达在第7 d时最高,到28 d逐步降低。各组间比较中,空白对照组FGFm RNA及VEGFm RNA表达最低,在其他各干预组中,泼尼松干预组及高剂量果王素干预组FGFm RNA及VEGFm RNA表达明显低于病理模型组、低剂量果王素干预组及中剂量果王素干预组（P＜0.05）,泼尼松干预组和高剂量果王素干预组无显著差异（P＞0.05）。结论:果王素对大鼠肺纤维化有抑制作用,其作用机制与调节FGF、VEGF的表达有关。
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