本研究优化了黄毛耳草总黄酮的提取工艺;确定了用大孔树脂和聚酰胺纯化黄毛耳草总黄酮的条件;筛选了发酵黄毛耳草的真菌——木霉,研究了木霉发酵对提取黄毛耳草总黄酮的影响。根据单因素试验的结果,设置合适的水平,采用正交试验设计考察浸提次数、乙醇浓度、提取时间和液料比对提取效果的影响。通过方差分析,在考察的影响因素中,影响最显著的因素是提取乙醇的浓度,其次是提取次数,提取时间的影响最小,同时确定了最佳的提取工艺,即用12倍于黄毛耳草体积的70%乙醇提取2次,每次1.5小时。重现性试验表明此工艺重现性好,工艺可行。在用此工艺所得到的提取物中,总黄酮的质量分数为12.32%。从五种大孔树脂选择用NKA-9对黄毛耳草总黄酮进行初步纯化,通过进行动态吸附试验,确定了初步纯化工艺为以1.5 mL/min的速率将浓度约为2.5 mg/mL提取液上柱,再用10 BV pH=5的水淋洗,以除去多糖杂质,淋洗速率为1.5 mL min,最后用3 BV的70%乙醇2.0 mL/min洗脱。用NKA-9初步纯化后虽然所得固体中的黄酮的质量分数提高了20.33%,达到32.65%,但纯度仍然不高需要进一步纯化。通过静态吸附试验比较硅胶和聚酰胺纯化黄毛耳草总黄酮的优劣,发现聚酰胺比硅胶更适合用于黄毛耳草总黄酮的进一步纯化。本研究所确定的聚酰胺纯化黄毛耳草总黄酮的工艺为用10 BV pH=5的水淋洗以除去糖,再用4 BV 50%的乙醇洗脱,此工艺稳定,重现性高,是可行的。用聚酰胺进一步纯化,取得了较好的效果,所得固体中的黄酮的质量分数为48.53%,提高了16.0%。从平菇、香菇、木霉、桑黄、马勃五种真菌中筛选出木霉作为发酵黄毛耳草的菌种;黄毛耳草发酵前后黄酮提取率和黄酮得率明显增加,木霉发酵对黄毛耳草中总黄酮的提取有促进作用。