论文部分内容阅读
目的:探讨红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)在白血病细胞上的表达及其意义,以及急性白血病患者血清红细胞生成素(serum erythropoietin,sEPO)水平与贫血的关系,对急性白血病(acute leukemia,AL)贫血的细胞因子治疗提供新的理论依据。方法:病例来源于2005年5月16日至2005年12月21日山西省人民医院及山西医科大学附属第二医院门诊及住院初治、未缓解及复发AL患者(白血病细胞>50%并排除M6) 30例,均经骨髓穿刺检查、免疫分型、染色体及融合基因检查确诊,进行WHO分型,并做血、尿常规,肝、肾功能及EPO检测,以排除肝、肾功能异常的影响。其中男15例,女15例,年龄3—74岁,平均年龄31.2±19.0岁,包括急性髓细胞性白血病(acute myelogenous leukemia ,AML)21例,急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)9例。用EDTA抗凝管抽取骨髓或外周血1.5ml后沿管壁摇匀,显微镜下形态学观察记数,白血病细胞比例平均为79.9%±11.8%。提取骨髓白血病细胞总RNA,用紫外可见分光光度计在260nm处测定含量,1%琼脂糖凝胶中电泳,鉴定RNA的带形。RT-PCR法测定白血病细胞EPOR mRNA表达,β-肌动蛋白作为内对照,30个循环后1%琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像分析系统进行凝胶扫描及分析,以EPOR mRNA扩增带与β-肌动蛋白扩增带的灰度比值作为EPOR mRNA表达相对值。用干燥管抽取空腹静脉血3ml,离心或自然沉降后吸出血清置干燥管中,采用化学发光法测定sEPO。采用日本生产的全自动血细胞分析仪测定Hb水平。结果: 30例AL患者中18例表达EPOR,表达率为60%,其中AML的EPOR表达率为61.9%(13/21),ALL的EPOR表达率为55.6%(5/9),AML与ALL的EPOR表达率无显著差异(P>0.05)。AL的EPOR表达率明显低于对照组(86.7%)(P<0.05)。AML的EPOR mRNA平均表达量为0.4236±0.4433,高于ALL(0.1737±0.1922)(P<0.05)。30例AL的EPOR mRNA平均表达量为0.3486±0.3991,明显低于对照组(0.6526±0.3231)(P<0.01)。AL患者的sEPO平均为322.3±232.0,明显高于对照组(44.8±55.6)(P<0.01),与Hb呈负相关关系(r=– 0.658,P<0.01)。结论:急性白血病细胞有EPOR的表达,但表达水平较低,AML与ALL的EPOR表达率无显著差异。AL时EPO对贫血的负反馈机制是完整的,AL贫血不完全是由于机体EPO产生不足所致,推测主要是由于骨髓红系生成受抑制引起。重组人红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin ,r-HuEPO)在治疗急性白血病贫血中起着重要作用,对白血病贫血的病人使用r-HuEPO治疗是否可能促进白血病细胞增殖尚需进一步地全面分析与研究。