目的:外周血中的肿瘤细胞,即循环肿瘤细胞,在肿瘤的早期诊断、个体化治疗、预后评估等方面具有重要价值。本研究目的为验证插入人端粒酶启动子和绿色荧光蛋白基因的人单纯疱疹病毒(oHSV1-hTERT-GFP)检测乳腺癌患者外周血循环血肿瘤细胞方法的可行性,并通过测序研究该法捕捉的肿瘤细胞的生物学特性。方法:RT-PCR技术检测乳腺癌细胞系和外周血白细胞中端粒酶逆转录酶表达情况;对多种乳腺癌细胞系按照MOI=1的比例感染oHSV1-hTERT-GFP病毒,进行感染率的检测;抽取正常健康人外周血4ml,将乳腺癌细胞系分别按一定梯度加到外周血中,按照MOI=1的比例感染oHSV1-hTERT-GFP病毒,24h后收集细胞,流式细胞仪检测GFP+/CD45-细胞数,进行检出率的测定,并用Epcam验证细胞来源。对感染oHSV1-hTERT-GFP病毒前后的乳腺癌细胞系进行转录组测序,研究其分子生物学特性。结果:RT-PCT的检测结果显示乳腺癌细胞系呈现端粒酶逆转录酶高表达状态,而外周血中白细胞的端粒酶逆转录酶表达量低。我们用oHSV1-hTERT-GFP病毒感染乳腺癌细胞系及外周血白细胞,通过激光共聚焦显微镜检测,提示感染率成功率高。我们将乳腺癌细胞掺入健康人外周血样本,检出率测定结果显示:外周血中加入MDA-MB-231细胞50,100,300(个)的检出数分别为38,100,166(个),平均回收率为67.6%。对感染病毒前后的乳腺癌细胞系进行转录组测序分析,提示oHSV1-hTERT-GFP病毒的感染对乳腺癌细胞系分子生物学过程改变较明显。结论:本研究验证了 一种新型循环肿瘤细胞检测方法的可行性。但对感染oHSV1-hTERT-GFP病毒后的乳腺癌细胞进行转录组水平的研究指出该法不适于对富集后的CTCs的进一步深入的分子生物学水平研究。