论文部分内容阅读
本试验选取与罗非鱼抗菌机制(溶菌→抗原呈递→除菌)相关的C型溶菌酶、MHCⅡ、IgM、Hepcidin基因作为研究目标,采用中心复合试验设计和响应曲面分析法,在试验室条件下研究了温度(18-34℃)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)浓度(0.4-6.4×105cfu/mL)对此4个基因在吉富罗非鱼幼鱼肠(intestine)、肝脏组织(hepatopancreas)基因表达量的联合效应。结果表明:(1)温度一次效应、二次效应对罗非鱼肠、肝脏组织IgM基因表达量均有极显著影响(P<0.01);无乳链球菌浓度一次效应对基因表达量无显著影响(P>0.05)。只在肠组织,温度与无乳链球菌浓度间互作效应显著(P<0.05),且温度效应大于浓度。分别建立了吉富罗非鱼肠、肝脏IgM基因表达量模型(方程中T代表温度,S代表无乳链球菌):Y-i=0.89416-0.11213T+0.40982S-5.49×10-3T×S+3.69×10-3T2-0.041717S2Y-h=5.91988-0.49657T-0.3665S+8.25×10-3T×S+0.012332T2+0.027961S2方程决定系数分别为0.9832、0.983,说明方程的拟合度很高;校正系数分别为0.9665、0.9661,模型选择恰当,预测系数分别为0.8329、0.8317,表明可用于吉富罗非鱼IgM基因表达量的预测。(2)温度一次效应、二次效应,以及无乳链球菌浓度一次效应对罗非鱼肠、肝脏组织MHCⅡ基因表达量均有极显著影响(P<0.01);无乳链球菌浓度二次效应无显著影响(P>0.05)。温度与无乳链球菌浓度间互作效应不显著(P>0.05),且温度效应大于浓度,分别建立了吉富罗非鱼肠、肝脏MHCⅡ基因表达量模型:Y-i=-2.01656+0.15758T+0.12399S-8.02×10-5T×S-2.38×10-3T2-8.37×10-3S2Y-h=-4.99697+0.43387T-0.10429S+4.79×10-3T×S-7.26×10-3T2+0.012283S2方程决定系数分别为0.9775、0.9843,说明方程的拟合度很高;校正系数分别为0.9551、0.9685,模型选择恰当,预测系数分别为0.7989、0.8694,表明可用于吉富罗非鱼MHCⅡ基因表达量的预测。(3)温度一次效应、二次效应,以及无乳链球菌浓度一次效应对罗非鱼肠、肝脏组织C型溶菌酶基因表达量均有极显著影响(P<0.01);病菌浓度二次效应不显著(P>0.05)。在肝脏组织双因子互作效应显著(P<0.05),且温度效应大于浓度。分别建立了吉富罗非鱼肠、肝脏C型溶菌酶基因表达量模型:Y-i=7.89294-0.60287T+0.15724S-2.4×10-3T×S+0.012645T2-1.51×10-3S2Y-h=9.08919+-0.71431T+0.14081S-4.76×10-3T×S+0.015534T2+0.010734S2方程决定系数分别为0.983、0.9935,说明方程的拟合度很高;校正系数分别为0.9659、0.9871,模型选择恰当,预测系数分别为0.8591、0.9373,表明可用于吉富罗非鱼C型溶菌酶基因表达量的预测。(4)无乳链球菌浓度的一次、二次效应以及温度的一次效应对罗非鱼肠、肝脏组织Hepcidin基因表达量均有显著影响(P<0.01);温度与无乳链球菌浓度间互作效应不显著(P>0.05),且温度效应大于浓度。分别建立了吉富罗非鱼肠、肝脏Hepcidin基因表达量模型:Y-i=0.26327+0.03552T+6.58×10-3S-1.07×10-3T×S-2.96×10-4T2+5.94×10-3S2Y-h=1.14776-0.047564T+0.091206S-6.02×10-4T×S+1.59×10-3T2-7.5×10-3S2方程决定系数分别为0.9876、0.9741,说明方程的拟合度很高;校正系数分别为0.9751、0.9482,模型选择恰当,预测系数分别为0.9322、0.8255,表明可用于吉富罗非鱼Hepcidin基因表达量的预测。本试验研究结果可以为罗非鱼抗菌分子机制的建立、抗病品种的选育以及无乳链球菌疫苗的研发、免疫效果的检测提供理论基础。