【摘 要】
:
目的:研究阿柏西普对实验性葡萄膜黑色素瘤的治疗作用及其潜在机制。方法:1.建立葡萄膜黑色素瘤动物模型,观察不同剂量的阿柏西普对葡萄膜黑色素瘤动物模型的影响。C57BL/6雌性小鼠(8周龄)麻醉成功(腹腔内注射10%水合氯醛)后,无菌33G针头沿角巩膜缘平行于虹膜表面穿刺进入前房,放出适量房水,然后通过微量注射器将2.5×10~4/4μL悬浮B16F10黑色素瘤细胞液注入小鼠前房内,使肿瘤细胞在前房
【基金项目】
:
山东省医药卫生科技发展计划项目(编号:2018ws194); 山东省自然科学基金面上项目(编号:ZR2020MH393);
论文部分内容阅读
目的:研究阿柏西普对实验性葡萄膜黑色素瘤的治疗作用及其潜在机制。方法:1.建立葡萄膜黑色素瘤动物模型,观察不同剂量的阿柏西普对葡萄膜黑色素瘤动物模型的影响。C57BL/6雌性小鼠(8周龄)麻醉成功(腹腔内注射10%水合氯醛)后,无菌33G针头沿角巩膜缘平行于虹膜表面穿刺进入前房,放出适量房水,然后通过微量注射器将2.5×10~4/4μL悬浮B16F10黑色素瘤细胞液注入小鼠前房内,使肿瘤细胞在前房内生长。将接种肿瘤细胞后的小鼠分为4组(每组7只眼)。第1组为对照组,前房内注入4μL PBS液;第2组前房内注射4μL低剂量的阿柏西普(2μg/4μL,相当于应用于人体的浓度)进行干预;第3组前房内注射4μL中剂量的阿柏西普(20μg/4μL)进行干预;第4组前房内注射4μL高剂量的阿柏西普(40μg/4μL)进行干预。通过裂隙灯生物显微镜观察各组小鼠眼球变化,每周观察3次,手持式视网膜照相机进行拍照记录。通过记录前房内肿瘤体积占前房体积的百分比来判断肿瘤的大小,当肿瘤占据前房80%-100%体积时,通过颈椎脱位处死小鼠,将小鼠眼球于10%福尔马林中固定48小时,石蜡包埋,切片,HE染色,观察每组眼球睫状体炎症反应、新生血管数量。2.探讨不同剂量的阿柏西普对B16F10黑色素瘤细胞生长过程的影响。将B16F10黑色素瘤细胞培养至对数生长期,分为实验组和对照组,实验组加入含不同浓度的阿柏西普(2μg/10μL、20μg/10μL、40μg/10μL)与DMEM混合的培养液进行干预,对照组加入等量DMEM培养液继续培养。采用实时细胞电子分析系统(Real-Time Cell Electronic sensing system,RT-CES)分别动态监测B16F10黑色素瘤细胞的生长过程。CCK-8进一步研究不同剂量的阿柏西普对黑色素瘤细胞生长的作用。生存率(%)=([A]阿柏西普/[A]对照组)×100,A为相关样本在490nm的吸光度值。定量PCR分析黑色素瘤细胞经阿柏西普干预后VEGF-A m RNA的表达水平。采用ELISA检测黑色素瘤细胞标本中的VEGF-A的分泌。流式细胞仪对实验组黑色素瘤细胞进行细胞周期及细胞凋亡检测。结果:1.不同剂量的阿柏西普对葡萄膜黑色素瘤动物模型影响的观察。观察接种葡萄膜黑色素瘤后C57BL/6小鼠在不同剂量阿柏西普作用下的反应,注射葡萄膜黑色素瘤细胞3-5天后小鼠前房出现明显的炎症反应。裂隙灯显微镜下可观察到小鼠角膜混浊,虹膜新生血管、前房积脓。阿柏西普干预5-7天后,中剂量和高剂量模型组炎症反应开始减轻,角膜透明度提升,虹膜轻度充血,前房积脓渐消。2.不同剂量的阿柏西普对B16F10黑色素瘤细胞生长过程的影响。(1)RT-CES结果显示:2μg/10μL,20μg/10μL,40μg/10μL的阿柏西普作用B16F10细胞24h后,阿柏西普可显著抑制B16F10葡萄膜黑色素瘤细胞的生长,并呈现浓度依赖。(2)2μg/10μL,20μg/10μL,40μg/10μL的阿柏西普作用B16F10细胞24h后,CCK-8检测显示:实验组B16F10细胞生存率分别为(95.10%±1.76)%,(87.33%±2.20)%和(74.36±1.67)%。(3)RT-PCR结果提示:2μg/10μL,20μg/10μL,40μg/10μL的阿柏西普作用B16F10细胞24h后,阿柏西普能够显著下调细胞中VEGF-A m RNA的表达,其中高剂量组抑制作用最为明显。(4)ELISA实验结果显示:B16F10细胞经过2μg/10μL,20μg/10μL,40μg/10μL的阿柏西普作用24h后,阿柏西普能够显著抑制细胞中VEGF-A的生成,其中高剂量组抑制作用最为显著。(5)流式细胞检测结果:2μg/10μL,20μg/10μL,40μg/10μL阿柏西普干预B16F10细胞24h后,与对照组相比,细胞凋亡率分别为0%、3.51%、11.1%和14.77%,G1期细胞比例分别为(27.6±0.36)%、(64.09±0.34)%、(66.02±0.65)%和(67.49±0.33)%,差异均有统计学意义,P<0.05。结论:1.阿柏西普对葡萄膜黑色素瘤细胞的生长有显著抑制作用。2.阿柏西普能够明显的抑制眼内新生血管生成,减轻睫状体炎症反应。3.阿柏西普能够下调VEGF-A m RNA的表达,抑制VEGF-A的分泌水平,诱导细胞发生凋亡和S期阻滞,从而降低葡萄膜黑色素瘤细胞的活性,抑制其生长,并且呈浓度依赖。
其他文献
目的:评价甘草-干姜“辛甘化阳”配伍治疗肺阳虚型哮喘的药效作用;探讨甘草-干姜“辛甘化阳”配伍治疗肺阳虚型哮喘的免疫分子机制;从能量代谢的角度探讨甘草-干姜“辛甘化阳”配伍原理内涵,进一步阐明甘草-干姜“辛甘化阳”配伍治疗肺阳虚型哮喘的可行性。方法:1采用UHPLC-Q Exactive Orbitrap MS技术,在正、负离子模式下采集质谱数据,根据色谱保留时间以及质谱信息参照相关文献及标准品信
文章介绍了微波加热技术在沥青混凝土路面养护和路面除冰等领域的应用,针对传统沥青混合料吸收微波的能力较差的问题,提出添加微波吸收材料以促进微波的吸收效率,从而提高沥青混凝土的加热自愈合效率,并结合已有文献对常用微波吸收材料及其应用进行了介绍。
目的1.研究过量的甲状腺素对负透镜诱导近视豚鼠模型的等效球镜度、眼轴长度、体质量和肛门温度的影响,为探究甲亢与近视关系奠定基础,为近视防控提供新的思路。2.利用酶联免疫吸附实验(ELISA)对豚鼠血清中的雌二醇(estradiol,E2)、睾酮(testosterone,T)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,F
目的:确定补骨脂-小茴香的最佳配伍比例,优选补骨脂颗粒的最佳提取工艺及成型工艺,对补骨脂颗粒进行质量标准研究,为补骨脂颗粒的生产提供依据。方法:1.利用脾肾阳虚泄泻大鼠模型,通过计算体质量、摄食量、腹泻指数、脏器指数等指标,确定不同配伍比例补骨脂-小茴香的治疗效果。并对灌胃不同比例补骨脂-小茴香的正常大鼠血清中ALT、AST、TBIL的含量进行测定,确定其毒性大小。综合治疗效果与毒性大小,确定最佳
<正>[原(病)文]懂得放弃也是一种美秋天真美,充满着诗情画意,既因为它的满山红枫,也由于它的枯叶飘零。那么一个人做一件事,他能向着目标,坚持不懈,固然是被人人称道。与此同时我们也应看到,当一个人对于一个目标太偏激时,能欣然放弃,也是一种美。所以说,懂得放弃也是一种美。相信许多人对法国大作家莫泊桑的小说《项链》并不陌生,那么也一定对女主人公玛蒂尔德印象颇深。她就是怀着对现实的不满,对奢华生活的无尽
【目的】调查肺癌患者抑郁发生情况,并分析肺癌患者抑郁的危险因素,构建列线图风险预测模型。【方法】2021年2月至2021年8月采用横断面研究和便利抽样法对济南市两所三级甲等医院住院的320例肺癌患者以是否发生抑郁分为抑郁组与非抑郁组,收集患者的相关资料,包括:一般人口学资料、临床特征、肺癌病耻感、中医体质、心理弹性、疼痛以及社会支持。将连续性变量进行分类转化后,对一般人口学资料、临床资料以及中医体
背景孔源性视网膜脱离是一种常见的眼部致盲性疾病。如果治疗不及时,往往会导致严重的视力丧失甚至是失明。手术是治疗孔源性视网膜脱离的主要手段,目前通过手术治疗的解剖复位率达90%以上。而孔源性视网膜脱离术后再次复发不仅会严重影响其预后视力,还会对患者造成更大的心理和经济负担。因此,有必要对其临床特征和术后复发的相关因素进行分析。目的探讨孔源性视网膜脱离患者基本临床特征以及术后复发的相关因素。方法本研究
目的通过建立负透镜诱导型近视(lens-induced myopia,LIM)豚鼠模型,观察分析LIM豚鼠睫状肌的形态与功能变化,探讨电针刺激LIM豚鼠双侧太阳穴、合谷穴影响睫状肌纤维化病变相关分子的表达,延缓LIM豚鼠近视发生发展的分子机制,为临床电针治疗近视提供新的干预靶点。方法实验包括两部分。第一部分:近视豚鼠睫状肌纤维化病变及电针干预作用研究。将154只2周龄健康豚鼠随机分为正常对照(no
目的本研究运用功能性近红外光谱技术(functional near-infrared spectroscopy,f NIRS)采集、观察屈光参差性弱视儿童初级视皮层(primary visual cortex,V1)、次级视皮层(secondary visual cortex,V2)氧合(oxyhemoglobin,Hb O2)/脱氧(deoxyhemoglobin,Hb)血红蛋白含量的变化,分析
木里矿区处于黄河流域上游高原高寒地区,生态环境脆弱,水源涵养功能极为重要。以往煤矿露天的开采产生了一系列生态环境问题,其中水系湿地破坏是主要问题之一,造成了大量的采坑积水,影响了矿区的水源涵养功能。在矿区生态修复治理中,基于对矿区水文地质条件的分析,通过对采坑积水分布特征、水质监测和积水形成规律的研究,结合采坑、渣山地形地貌特征,因地制宜,提出了针对采坑积水修复治理的水系连通方法,分别为积水整治形