斑马鱼(Danio rerio)具有个体小、易养殖、繁殖能力强、生殖周期短、遗传背景清晰、体外受精且胚胎发育透明等特点。近年来,斑马鱼作为一种新型模式动物被广泛应用于发育生物学、遗传学、行为学、环境监测、肿瘤生物学和药物研制与筛选等领域。斑马鱼同样是在体研究神经系统功能和形态发育的良好模型,斑马鱼在神经退行性病变研究领域关注度越来越高。尽管与人类中枢神经系统有一定的区别,但斑马鱼的神经元和神经胶质细胞类型以及疾病相关基因都与人类都十分相似。迄今为止,从形态学角度来研究斑马鱼神经系统的报道较少,斑马鱼神经系统超微结构的系统描述更是缺乏。本研究从形态学角度来阐述和解读斑马鱼脑组织构造,为进一步研究斑马鱼神经系统的发育与功能代谢提供形态学依据,并为斑马鱼神经三维构建和结构量化奠定基础。试验Ⅰ 斑马鱼脑的显微结构应用光镜技术对斑马鱼脑的组织形态进行观察。斑马鱼脑包括端脑、间脑、中脑、小脑及延脑五部分,端脑呈长椭圆状,端脑由嗅囊、嗅叶和大脑半球构成。脑组织形态学特点有以下方面,嗅叶及嗅嚢分化较明显,嗅球前方有一对嗅神经,后端伸出嗅茎与大脑半球联系。间脑背侧连有松果体,腹侧有心形漏斗,漏斗前端连接脑垂体。中脑视叶膨大,与视觉发达相关。小脑发达,与其活跃的生活习性相适应。延脑前部稍稍隆起。光镜下,神经核团分布于斑马鱼各个脑部的相应部位,本试验可以观察到斑马鱼脑部147个神经核团。试验Ⅱ 斑马鱼脑的超微结构应用透射电镜对斑马鱼脑超微结构进行观察。电镜下,可以观察到斑马鱼各个脑部的细胞形态和结构,如神经细胞、突触和血脑屏障。透射电镜下可见端脑中僧帽细胞以及小脑中的颗粒细胞、浦肯野细胞和高尔基细胞。突触可以细分为轴—树突触、轴—体突触和轴—轴突触等。血脑屏障系统在斑马鱼各个脑部都可以观察到,其由连续性毛细血管内皮细胞、基膜和血管周围神经胶质细胞构成。在透射电镜下观察到血脑屏障在端脑中分布较多。试验Ⅲ 斑马鱼脑免疫组化对斑马鱼脑进行BDNF和CD34免疫组化试验,观察到斑马鱼小脑和间脑对BDNF和CD34反应呈阴性,而斑马鱼中脑视盖对BDNF反应阳性,对CD34反应亦阳性。反应部位为中脑视盖边缘层和神经层交界处,而CD34在此处的阳性反应更加明显。