气管内移植人脐血间充质干细胞对博来霉素致小鼠肺纤维化的作用

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目的:探讨气管内移植人脐血间充质干细胞(HUCBMSCs)对于博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的作用,比较气管内及尾静脉移植人脐血间充质干细胞对肺纤维化的治疗效果。  方法:取第2代HUCBMSCs培养至4代;60只无特定病原体的雄性昆明小鼠随机分成4组:阴性对照组(Cont组)、博来霉素组(BLM组)、HUCBMSCs移植Ⅰ组(MⅠ组)和HUCBMSCs移植Ⅱ组(MⅡ组),每组15只;后3组小鼠采用气管内插管灌注博来霉素制造肺纤维化模型,24小时后,MⅠ组各小鼠气管内灌注5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记的HUCBMSCs,MⅡ组各小鼠尾静脉内注射Brdu标记的HUCBMSCs,分别于模型建造后的第7、14、28天每组各处死5只小鼠取材。采用苏木精-伊红(HE)染色法和马松(Masson)染色法观察小鼠肺组织形态学上的变化;免疫组织化学法检测间充质干细胞在肺组织的定位和分布;碱水解法测定羟脯氨酸的水平;免疫印迹法检测TGF-β1、α-SMA的蛋白表达量。  结果:两组间充质干细胞移植组第7、14、28天均可见Brdu标记的细胞,且随着时间延长,被标记细胞数逐渐减少;3个时间点的MⅠ组、MⅡ组的肺泡炎症和肺纤维化程度均分别较博来霉素组轻,差异有统计学意义(P<0.05)。博来霉素组小鼠肺组织羟脯氨酸含量较阴性对照组增高,且随着时间延长呈逐渐增高趋势,MⅠ组、MⅡ组肺组织羟脯氨酸的含量较BLM组低,MⅠ组和MⅡ组HYP表达量差异无统计学意义(P>0.05)肺组织中TGF-β1、α-SMA的表达情况:BLM组>MⅠ组、MⅡ组>Cont组(P<0.05);MⅠ组和MⅡ组表达量差异无统计学意义(P>0.05)。  结论:气管内移植HUCBMSCs可以定植于受损的肺组织中,能够减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。
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