紫花地丁中芹菜素的提取与分离纯化技术研究

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本文对吉首大学张家界校区周边不同季节紫花地丁及几种堇菜科植物中芹菜素含量进行测定分析;研究了水浴提取、索氏提取、微波辅助提取、超声波辅助提取和超临界CO2萃取等方法对紫花地丁等中芹菜素的提取效果;按四因素水平设计L16(45)正交组合研究提取溶剂浓度、料液比、提取温度和提取时间对紫花地丁中芹菜素提取的影响,根据方差分析结果就紫花地丁中芹菜素提取条件作了优选;根据不同大孔吸附树脂对芹菜素的静态吸附、动态吸附及解吸效果选择了较佳分离纯化芹菜素的大孔吸附树脂:利用HPLC、UV分别对紫花地丁等提取物与芹菜素标准品进行了测定,建立了紫花地丁中芹菜素的检测方法。研究结果表明:紫花地丁等植物中芹菜素提取以超声波辅助甲醇溶液提取较佳;最佳提取条件为:提取温度50℃、提取时间30 min、甲醇浓度70%、料液比1∶10:大孔吸附树脂LSA-10及柱层析硅胶对紫花地丁中芹菜素的分离纯化效果较好。超临界CO2萃取紫花地丁芹菜素的优化条件为:固液比5∶3、萃取压力20 MPa、萃取温度55℃、萃取时间2 h、分离斧Ⅰ的温度55℃、压力9 MPa、分离斧Ⅱ的温度40℃、压力5 MPa。在1.58~15.80mg.L-1范围内,HPLC法检测芹菜素溶液的进样量与峰面积响应值呈良好的线性关系,r=0.9996;在3.33~19.98μg/mL范围内UV法检测芹菜素在345nm处的吸光值大小与芹菜素浓度呈线性关系,r=0.9999;经测定,春季采收的紫花地丁中芹菜素含量最高,为0.0236%;芹菜素的含量紫花地丁(0.0221%)>辽宁堇菜(0.0144%)>深山堇菜(0.0137%)>毛堇菜(0.0120%);经过分离、纯化的芹菜素,其含量已达到95.8%。
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