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目的:探讨白藜芦醇对戊四氮诱导的癫痫小鼠的脑保护作用及其机制,深入研究癫痫发作的病理变化及其分子机制,探索新型有效的阻止癫痫发作、抑制癫痫发作后脑组织病理改变的药物。方法:1取成年健康清洁级雄性ICR小鼠50只、Nrf2基因敲除小鼠(Nrf2-/-,ICR背景)10只,体重25-35g之间。2分组及干预方式如下:ICR小鼠分为5组:1)正常对照组(NC)2)溶剂组(SOL)3)戊四氮组(PTZ)4)戊四氮+白藜芦醇组(P+R)5)戊四氮+白藜芦醇+sirtinol组(P+R+S)6)Nrf-/-+戊四氮+白藜芦醇组(NRF-/-P+R)3以戊四氮诱导的慢性癫痫小鼠模型作为研究对象,以白藜芦醇、sirtinol作为干预剂,记录戊四氮诱导小鼠癫痫的发作等级,Morris水迷宫检测小鼠认知、记忆能力,Western Blot检测小鼠海马组织中SIRT1、Nrf2、HO-1的蛋白表达,分光光度法检测小鼠海马组织中MDA、GSH的变化,透射电镜观察癫痫小鼠海马CA1区神经细胞超微结构的变化。结果:1行为学观察结果:1)NC组、SOL组:小鼠无癫痫发作。2)PTZ组、P+R组、P+R+S组、Nrf-/-P+R组:四组小鼠在给药过程中均不同程度的癫痫发作,平均癫痫发作等级总体呈上升趋势。3)与PTZ组相比,P+R组癫痫发作等级明显降低。4)与P+R组相比,以P+R+S组、Nrf-/-P+R组癫痫发作等级明显升高。2 Morris水迷宫监测结果2.1定向航行实验:1)在实验过程中,各组小鼠平均逃避潜伏期均呈缩短趋势,以NC组、SOL组缩短最明显。2)与NC组、SOL组相比,PTZ组小鼠逃避潜伏期缩短较少。3)与PTZ组相比,P+R组小鼠逃避潜伏期缩短更明显。4)与P+R组相比,P+R+S组、Nrf-/-P+R组逃避潜伏期缩短又明显减少。2.2空间探索实验结果:1)各组小鼠穿越平台区域次数,以NC组、SOL组最多。2)与NC组、SOL组相比,PTZ组小鼠穿越平台区域次数明显减少。3)与PTZ组相比,P+R组小鼠穿越平台区域次数明显增多。4)与P+R组相比,P+R+S组、Nrf-/-P+R组小鼠穿越平台区域次数明显减少,部分小鼠穿台次数为零。3小鼠海马组织中氧化应激参数的改变:3.1 GSH含量:1)各组小鼠海马组织中GSH含量的平均值以NC组、SOL组最高。2)与NC组、SOL组相比,PTZ组小鼠GSH含量明显减少。3)与PTZ组相比,P+R组GSH含量明显增多。4)与P+R组相比,P+R+S组、Nrf-/-P+R组GSH含量明显减少。3.2 MDA含量1)各组小鼠海马组织中MDA含量NC组、SOL组最低。2)与NC组、SOL组相比,PTZ组小鼠MDA含量明显增加。3)与PTZ组相比,P+R组MDA含量明显降低。4)与P+R组相比,P+R+S组、Nrf-/-P+R组MDA含量明显增加。4 Western Blot监测小鼠海马组织中SIRT1、Nrf2、HO-1的表达:1)在本次实验中,3种指标表达量的变化趋势大体相似。2)与PTZ组相比,P+R组表达量明显增多。3)与P+R组相比,P+R+S组表达量明显减少。5透射电镜观察海马CA1区超微结构变化:1)NC组、SOL组神经元形态结构、胞核、染色质、细胞膜、细胞器器未见异常改变。2)PTZ组、P+R组、P+R+S组、Nrf-/-P+R组均有不同程度异常改变,表现为细胞肿胀,线粒体嵴肿胀、断裂溶解伴膜破裂;以P+R组最轻,PTZ组、P+R+S组、Nrf-/-P+R组异常改变相似且较P+R组明显明显。结论:1癫痫发作可导致脑组织内发生氧化应激,造成神经细胞的损伤、神经细胞超微结构改变甚至死亡。2 SIRT1可激活Nrf2-Are信号通路,SIRT1-Nrf2-Are信号通路在机体抗氧化、保护细胞免受有害刺激损伤中具有重要作用。3白藜芦醇可激活SIRT1-Nrf2-Are信号通路,促进抗氧化蛋白的表达并发挥清除活性自由基的作用,减轻癫痫后神经细胞结构损伤、抑制癫痫后脑组织病理改变的进展,降低癫痫发作等级,改善癫痫后认知、记忆损伤,改善癫痫个体预后。