论文部分内容阅读
钝叶独行菜（Lepidium obtusum Basiner）属十字花科（Brassicaceae）独行菜属（Lepidium），是一种多年生草本植物。本文以钝叶独行菜为研究对象，利用液液萃取、大孔树脂和硅胶柱层析对钝叶独行菜乙醇提取物进行分离，得到不同的组分，并采用CCK-8法对各组分进行体外抗肿瘤细胞活性筛选；采用MCI柱色谱结合制备色谱对活性组分进行分离制备，获得17个单体化合物，采用质谱（MS）、核磁（NMR）等手段对分离得到的单体化合物进行结构鉴定，明确了其中4个化合物；选择人宫颈癌Hela、人胰腺癌PANC-1细胞等10种肿瘤细胞对这4个单体化合物进行进一步的抗肿瘤活性验证。得到以下结果：
1、钝叶独行菜乙醇提取物经乙酸乙酯萃取，水相部分采用大孔树脂柱层析，乙酸乙酯相部分采用硅胶柱层析，分别以乙醇-水和氯仿-甲醇体系梯度洗脱后得到24个组分。
2、不同组分体外抗人宫颈癌Hela细胞活性筛选结果表明在各组分浓度为50ng/mL时，氯仿-甲醇（50∶1）Ⅰ和氯仿-甲醇（50∶1）Ⅱ对其抑制作用较好，其中氯仿-甲醇（50∶1）Ⅱ对其抑制率达到35.80±10.84%；以钝叶独行菜乙醇提取物、乙酸乙酯部位、氯仿-甲醇（50∶1）Ⅰ和氯仿-甲醇（50∶1）Ⅱ为受试药物，分别对人胰腺癌PANC-1、肺癌H460细胞等9种肿瘤细胞进行进一步活性验证，发现氯仿-甲醇（50∶1）Ⅰ和氯仿-甲醇（50:∶1）Ⅱ对这些肿瘤细胞均具有抑制作用。
3、钝叶独行菜氯仿-甲醇（50∶1）Ⅰ和氯仿-甲醇（50∶1）Ⅱ通过MCI柱色谱，结合高效液相制备色谱共分离得到17个单体化合物，采用质谱和核磁等手段鉴定了其中4个化合物，分别为香草酸、丁香酸、对羟基苯甲酸乙酯和异香草酸。
4、通过10种肿瘤细胞对单体化合物的体外抗肿瘤活性进行进一步验证分析，发现上述4个单体化合物均对人肺癌H460、H1299和A549细胞和乳腺癌细胞MDA-MD-231和MCF-7细胞的抑制作用较为显著，其中对羟基苯甲酸乙酯对人肺癌H460细胞的抑制活性最为显著，其IC50值为0.14mM。
1、钝叶独行菜乙醇提取物经乙酸乙酯萃取，水相部分采用大孔树脂柱层析，乙酸乙酯相部分采用硅胶柱层析，分别以乙醇-水和氯仿-甲醇体系梯度洗脱后得到24个组分。
2、不同组分体外抗人宫颈癌Hela细胞活性筛选结果表明在各组分浓度为50ng/mL时，氯仿-甲醇（50∶1）Ⅰ和氯仿-甲醇（50∶1）Ⅱ对其抑制作用较好，其中氯仿-甲醇（50∶1）Ⅱ对其抑制率达到35.80±10.84%；以钝叶独行菜乙醇提取物、乙酸乙酯部位、氯仿-甲醇（50∶1）Ⅰ和氯仿-甲醇（50∶1）Ⅱ为受试药物，分别对人胰腺癌PANC-1、肺癌H460细胞等9种肿瘤细胞进行进一步活性验证，发现氯仿-甲醇（50∶1）Ⅰ和氯仿-甲醇（50:∶1）Ⅱ对这些肿瘤细胞均具有抑制作用。
3、钝叶独行菜氯仿-甲醇（50∶1）Ⅰ和氯仿-甲醇（50∶1）Ⅱ通过MCI柱色谱，结合高效液相制备色谱共分离得到17个单体化合物，采用质谱和核磁等手段鉴定了其中4个化合物，分别为香草酸、丁香酸、对羟基苯甲酸乙酯和异香草酸。
4、通过10种肿瘤细胞对单体化合物的体外抗肿瘤活性进行进一步验证分析，发现上述4个单体化合物均对人肺癌H460、H1299和A549细胞和乳腺癌细胞MDA-MD-231和MCF-7细胞的抑制作用较为显著，其中对羟基苯甲酸乙酯对人肺癌H460细胞的抑制活性最为显著，其IC50值为0.14mM。