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目的:乳腺癌是威胁全球女性健康最常见的恶性肿瘤之一,目前已位居我国女性癌症发病之首。转移是导致90%以上乳腺癌患者死亡的主要原因。乳腺癌的发生发展被认为是环境因素与基因共同作用的结果,目前研究认为,70%~95%的乳腺癌可能归因于环境因素和生活习惯。本文旨在探索典型环境内分泌干扰物2,3,7,8-四氯代二苯并-对-二噁英(TCDD)与邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)代谢产物邻苯二甲酸单(2-乙基己)酯(MEHP)单独以及共暴露对乳腺癌细胞MCF-7迁移和侵袭的影响,并初步探讨其相关调控机制。方法:1.TCDD/MEHP对乳腺癌细胞MCF-7迁移和侵袭能力的影响本次研究中毒物暴露计量分别为1nM、10nM和100nM的TCDD,和/或100μM MEHP。染毒处理乳腺癌细胞MCF-7 24小时后,Transwell实验检测其对乳腺癌细胞迁移能力和侵袭性的影响。2.TCDD/MEHP对乳腺癌细胞MCF-7迁移和侵袭相关基因表达的影响TCDD/MEHP染毒处理细胞24小时后,提取RNA,实时荧光定量PCR检测迁移和侵袭相关基因MMP2、MMP9、SLUG以及VIM基因的mRNA表达水平。3.TCDD可能通过活化AhR通路诱导乳腺癌细胞MCF-7的迁移和侵袭为研究TCDD诱导MCF-7细胞迁移和侵袭的过程中是否活化了AhR,实时荧光定量PCR检测1nM、10nM和100nM TCDD染毒处理24小时后AhR和CYP1A1基因的mRNA表达水平。化学合成AhR-siRNA和NC-siRNA转染MCF-7乳腺癌细胞48小时后,实时荧光定量PCR检测AhR基因的干扰效率。将siRNA转染MCF-7乳腺癌细胞48小时,并且100nM TCDD继续染毒处理细胞24小时,Transwell实验检测乳腺癌细胞MCF-7迁移和侵袭能力的改变,并通过实时荧光定量PCR检测MMP2、MMP9、SLUG以及VIM基因的m RNA表达水平的改变。结果:1.TCDD/MEHP对乳腺癌细胞MCF-7迁移和侵袭的影响transwell迁移和侵袭实验结果显示,与对照组相比,1nm、10nm以及100nmtcdd染毒处理组均促进了乳腺癌细胞mcf-7的迁移和侵袭能力(p<0.05),并且随染毒剂量的升高,迁移和侵袭能力增强(p<0.05)。与对照组相比,100μmmehp染毒处理组对乳腺癌细胞mcf-7的迁移能力和侵袭能力尽管没有统计学差异(p>0.05),但有增加的趋势。与对照组相比,100μmmehp与100nmtcdd共同染毒处理组增加了乳腺癌细胞mcf-7的迁移能力和侵袭能力(p<0.05)。100μmmehp与100nmtcdd共同染毒处理对乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力与毒物的单独处理效果不同(p<0.05)。2.tcdd/mehp对乳腺癌细胞mcf-7迁移和侵袭相关基因表达的影响实时荧光定量pcr结果显示,与对照相比,1nm、10nm以及100nmtcdd处理组mmp2和mmp9基因的mrna表达水平升高(p<0.05)。与对照组相比,100nmtcdd处理组slug和vim基因的mrna表达水平升高(p<0.05)。与对照组相比,100μmmehp处理组vim基因的mrna表达水平升高(p<0.05),而mmp2、mmp9和slug基因的mrna表达水平无统计学差异(p>0.05),但有升高的趋势。与对照组相比,100μmmehp与100nmtcdd共同染毒处理组mmp2、mmp9和vim基因的mrna表达水平升高(p<0.05)。3.tcdd通过活化ahr通路促进乳腺癌细胞mcf-7的迁移和侵袭为了研究tcdd诱导mcf-7细胞迁移和侵袭的过程中是否活化了ahr,实时荧光定量pcr结果显示,与对照组相比,1nm、10nm以及100nmtcdd处理组ahr基因的mrna表达水平无统计学差异(p>0.05)。但与对照组相比,1nm、10nm以及100nmtcdd组cyp1a1基因的mrna表达水平升高(p<0.05)。sirna转染细胞后,实时荧光定量pcr结果显示,ahr基因的mrna表达水平降低了74%(p<0.05)。transwell迁移实验和侵袭实验结果显示,ahr-sirna转染细胞后,100nmtcdd对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力降低了(p<0.05)。ahr-sirna转染细胞后,实时荧光定量pcr结果显示,100nmtcdd降低了slug基因的mrna表达水平(p<0.05),而对mmp2、mmp9和vim基因的mrna表达水平无统计学差异(p>0.05),但有降低的趋势。结论:1.tcdd能够活化ahr通路,并且增加mmp2、mmp9、slug以及vim基因的表达,促进乳腺癌细胞MCF-7的迁移和侵袭。2.TCDD可能通过促进MMP2、MMP9、SLUG以及VIM基因的表达,诱导乳腺癌细胞MCF-7发生上皮间质转化。3.MEHP可能促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭。4.MEHP与TCDD共暴露对乳腺癌细胞的迁移能力和侵袭性的影响与其单独暴露的效果不同。