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蛋白质药物因具有高活性、高特异性和低毒性等特点在癌症治疗领域受到了广泛关注。其中大多数蛋白质药物的作用靶点在细胞内,它们通常面临着体内稳定性差、易酶降解、难以进入细胞等挑战,大大限制了其临床转化。因此,开发蛋白质药物的高效细胞内递送体系至关重要。近些年来,研究者们构建了多种聚合物纳米体系用于提高蛋白质药物的循环稳定性、保持蛋白质药物的活性并实现其细胞内高效递送,进而用于肿瘤的靶向治疗。论文第一章介绍了几种常见的聚合物蛋白质纳米药物以及它们面临的挑战,并概述了针对这些挑战开发的各种新型聚合物纳米载体。为了实现蛋白质药物的高效靶向细胞内递送,本论文旨在开发集高效蛋白装载、高稳定性、主动靶向性、内涵体逃逸和还原响应性于一体的双硫交联纳米体系用于肺癌的靶向治疗。论文第二章设计制备了 cRGD和GALA双肽修饰的智能聚合物囊泡(cRGD/GALA-Ps)用于细胞色素C(CC)的高效主动装载以及αvβ3介导的靶向递送。cRGD/GALA-Ps由两亲性聚合物聚乙二醇-b-聚(三亚甲基碳酸酯-co-二硫戊环三亚甲基碳酸酯)-精胺(PEG-b-P(TMC-co-DTC)-spermine)、cRGD-PEG-b-P(TMC-co-DTC)和Mal-PEG-b-P(TMC-co-DTC)共同组装后,与GALA-SH通过迈克尔加成反应得到。其中cRGD的含量恒定为20 mol%,GALA的含量分别设定为2、4、6 mol%。cRGD/GALA-Ps 可高效装载 CC(cRGD/GALA-Ps-CC),其载药量约为 13 wt.%。cRGD/GALA-Ps-CC的粒径在65 nm左右,在GSH作用下可快速解交联释放CC。细胞实验表明,cRGD/GALA-Ps在αvβ3过表达的A549细胞中的靶向性虽然与cRGD-Ps类似,但其可以大幅促进FITC-CC的内涵体逃逸及细胞质递送。因此,cRGD/GALA-Ps-CC在A549细胞中的毒性明显高于cRGD-Ps-CC,当CC的浓度为15.4 时,含有0、2、4和6 mol%GALA的cRGD/GALA-Ps-CC的细胞存活率依次为76.2、51.0、29.6 和 35.5%。此外,相比 cRGD-Ps-CC,含 4 mol%GALA 的 cRGD/GALA-Ps-CC引起了明显增加的细胞凋亡,二者的凋亡率分别为14.4和36.4%。论文第三章基于纯天然的分子构建了双硫可逆交联的透明质酸纳米粒子(HA-NPs)用于蛋白质药物(CC和皂草素蛋白SAP)的高效包载及CD44介导的靶向递送。通过酯化反应在HA的羟基上引入苯丙氨酸四肽-硫辛酸(HA-g-(Phe4-LA)),并基于其制备了双硫可逆交联的HA-NPs。HA-NPs的粒径约为74nm,粒径分布窄(PDI=0.11),其可高效包载CC和SAP,在理论载药量为2 wt.%时,载药效率达100%。细胞实验结果表明,HA-NPs可以选择性靶向CD44高表达的A549细胞并通过受体介导的作用内吞,其内吞量是CD44低表达L929细胞和Anti-CD44抗体预封闭的A549细胞的3倍左右。包载SAP的HA-NPs可高效杀伤A549细胞,其半致死浓度(IC50)为1.6 μg/mL,约是L929细胞的三分之一。