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CsA肾病是以肾间质纤维化为特征的病理改变,表现为炎症细胞浸润,细胞外基质积聚,小管萎缩和管周毛细血管缺失,其发病机制与血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ）、内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)、氧化损伤、醛固酮活化等有关,其中细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）过度沉积是肾小管间质纤维化的重要特征。大量的实验证实在ECM的沉积中,转化生长因子-β1（Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1）起着重要的作用,证实其介导了肾小球的硬化和肾间质纤维化。在纤维化的进展过程中,有证据显示,肾小管上皮细胞表型转化—肌成纤维细胞转分化（tubular epithelial myofibroblast transdifferentiation ,TEMT）在肾小管病变、小管间质纤维化的发生、发展中起重要作用,其标志蛋白表达为a-平滑肌肌动蛋白（a-smooth muscular actin,a-SMA）。CsA慢性肾毒性属中医学“水肿”、“腰痛”、“虚劳”、“淋证”等疾病范畴。药毒伤肾,肝郁气滞,脾肾亏虚,水湿内停是本病的主要病机特点。治疗上应利水泻毒、补益脾肾、疏肝理气。柴苓汤是小柴胡汤与五苓散的合方,两方均出自张仲景的《伤寒杂病论》,由柴胡、黄芩、半夏、人参、甘草、生姜、大枣、猪苓、桂枝、白术、茯苓、泽泻组成,功能利水泻毒、疏肝健脾,与CsA肾病的发病机制和病变位置药证合拍。为研究利水泻毒、疏肝健脾方药治疗CsA肾病的作用机理、探索古方新用,我们采用CsA慢性肾毒性大鼠模型,观察利水泻毒、疏肝健脾中药柴苓汤及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对环孢素A肾病大鼠TGF-β1、a-SMA及Ⅲ型胶原（collagen typeⅢ,ColⅢ）表达的影响。研究结果如下:实验一柴苓汤对环孢素A肾病大鼠肾功能及病理形态学的影响健康雌性SD大鼠40只,随机分为对照组、模型组、缬沙坦组、柴苓汤组,每组10只。实验动物给予CsA 30mg·kg-1·d-1经口灌服,对照组给予等容量橄榄油,缬沙坦组予缬沙坦10mg·kg-1·d-1,柴苓汤组以柴苓汤3g·kg-1·d-1剂量给药,自来水溶解后经口灌胃,共28天。每周末将动物放入代谢笼中,收集24小时尿量,并测体重。所有动物于第29天断头处死,切取肾脏,常规制备血清及肾组织石蜡切片标本,行HE、Masson染色,观察肾组织病理学改变。检测血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）和尿肌酐（Ucr）的含量,计算肌酐清除率。结果显示:（1）对照组大鼠精神状况、活动、毛发、饮食、饮水、尿量等无明显改变。模型组精神萎靡、活动差、饮食、饮水量下降、毛发变黄、松乱、部分脱落。缬沙坦组一般状况好于模型组。柴苓汤组与缬沙坦组相同。各组大鼠体重在不同时间对比无明显差异（P>0.05）。应用CsA 2周后,模型组的尿量（19.650±9.569 ml）比正常对照组（15.650±2.015）略为增多,但各组间相互比较无明显差异。在应用CsA 3周后,模型组尿量（21.450±8.952）明显多于正常对照组（15.400±2.514）（P<0.05）,但缬沙坦组（17.400±5.854）及柴苓汤组（15.812±7.025）尿量并不增多,和正常对照组比较无显著差异。4周后,模型组尿量（29.150±13.695）明显高于正常对照组（15.800±2.529）及治疗组（16.700±4.939,16.734±6.198）（P<0.01）。（2）各组大鼠肾组织病理形态学改变:HE染色显示对照组肾小管上皮细胞排列整齐,无水肿;模型组肾小管上皮细胞坏死、脱落,间质大量炎性细胞浸润;缬沙坦组及柴苓汤组小管上皮细胞水肿、坏死、脱落及炎性细胞浸润均较模型组为轻。Masson染色结果显示对照组未见异常。模型组结构紊乱,小管间质胶原沉积显著增多。柴苓汤组及缬沙坦组小管间质胶原沉积较模型组明显减少。（3）各组大鼠尿素氮、血肌酐、肌酐清除率的变化:模型组大鼠尿素氮（11.395±1.824mmol/L）、血肌酐（99.067±5.426μmol/L）较对照组（6.3450±1.053,79.117±3.511）明显升高（ P < 0.01 ）,肌酐清除率（ 0.2823±0.0466ml/min ）较对照组（0.5415±0.0257）明显降低（P<0.01）。用药后,缬沙坦组及柴苓汤组尿素氮（8.615±0.878,7.160±0.679）、血肌酐（87.817±13.189,82.933±9.239）较模型组均明显降低（P<0.01）,肌酐清除率（0.3428±0.0624,0.3465±0.0383）较模型组明显升高（P<0.05）。实验二柴苓汤对环孢素A肾病大鼠a-SMA表达的影响模型复制、分组、给药方法同上,共28天。留取肾脏,采用RT-PCR、Western-Blot、免疫组化、流式细胞术检测大鼠肾脏a-SMA蛋白及mRNA的表达。结果显示:（1）采用RT-PCR测定a-SMA mRNA表达,结果显示对照组大鼠呈弱表达（ 0.9177±0.1239 ）,模型组表达明显增强（1.1950±0.0467）,与对照组相比有显著差异（P<0.01）,柴苓汤组（0.9857±0.0760）及缬沙坦组（1.0503±0.1420）较模型组表达明显降低（P<0.05）。（2）Western Blot检测肾组织a-SMA蛋白结果显示对照组大鼠肾组织a-SMA蛋白少量表达（0.2766±0.1405）,模型组表达显著增强（0.8788±0.3104）,与对照组相比差异有显著性（P<0.01）,柴苓汤组（0.5083±0.1092）及缬沙坦组（0.5467±0.0737）a-SMA的表达较模型组显著降低。（3）肾组织a-SMA免疫组化检测:光镜下对照组仅在血管平滑肌细胞强阳性表达,肾小球、肾小管及间质未见表达;模型组a-SMA表达主要在皮质区及皮髓交界的小管间质区,柴苓汤组及缬沙坦组小管间质区a-SMA表达较模型组明显减少。（4）肾组织a-SMA流式细胞术检测分析结果显示,a-SMA蛋白表达定量荧光指数（FI）模型组（0.9847±0.0065）明显高于对照组（0.8197±0.0064）（P<0.01）;柴苓汤组（0.9111±0.0068）及缬沙坦组（0.9131±0.0126）蛋白表达定量荧光指数明显低于模型组（P<0.01）。实验三柴苓汤对环孢素A肾病大鼠TGF-β1表达的影响模型复制、分组、给药方法同上,共28天。留取肾脏,采用RT-PCR、免疫组化检测大鼠肾脏TGF-β1蛋白及mRNA的表达。结果显示:（1）采用RT-PCR检测TGF-β1 mRNA表达,结果显示对照组大鼠呈弱表达（ 0.7927±0.0899 ）,模型组表达明显增强（1.1270±0.1239）,与对照组相比有显著差异（P<0.01）,柴苓汤组（0.8683±0.0938）较模型组明显降低（P<0.05）。（2）肾组织TGF-β1免疫组化表达结果显示对照组呈弱表达。模型组表达显著增强,见于肾小管、间质及肾小球处,柴苓汤组及缬沙坦组小管间质区TGF-β1表达较模型组明显减弱。实验四柴苓汤对环孢素A肾病大鼠ColⅢ表达的影响模型复制、分组、给药方法同上,共28天。留取肾脏,采用RT-PCR、Western Blot、免疫组化检测大鼠肾脏ColⅢ蛋白及mRNA的表达。结果显示:（1）采用RT-PCR检测ColⅢmRNA表达,结果显示对照组大鼠呈弱表达（0.7630±0.0557）,模型组表达明显增强（0.9180±0.0593）,与对照组相比差异有显著性（P<0.05）,柴苓汤组（0.8107±0.0761）及缬沙坦组（0.8300±0.0719）表达明显降低。（2）Western Blot检测肾组织ColⅢ蛋白结果显示对照组大鼠肾组织ColⅢ蛋白少量表达（0.2129±0.1089）,模型组表达明显增强（0.7334±0.1396）,与对照组相比差异有显著性（P<0.01）,柴苓汤组（0.3337±0.0802）及缬沙坦组（0.4343±0.1997）ColⅢ的表达较模型组显著降低（P<0.01,P<0.05）。（3）肾组织ColⅢ免疫组化表达结果显示,对照组极少量表达,呈浅黄色。模型组表达显著增加,可见棕黄色甚至呈棕褐色染色,柴苓汤组及缬沙坦组小管间质区ColⅢ表达较模型组明显减弱。结论:1柴苓汤对环孢素A肾病大鼠的肾组织结构损伤具有明显的改善作用,可减轻胶原纤维的表达及纤维化程度,降低血肌酐、尿素氮,升高肌酐清除率,改善肾功能。2柴苓汤可下调CsA所诱导的肾组织a-SMA的高表达,通过抑制肾小管上皮细胞表型转化延缓小管间质纤维化的进程。3柴苓汤可抑制CsA肾病大鼠肾组织中TGF-β1mRNA及蛋白的表达,从而减少细胞外基质沉积,延缓肾间质纤维化进程。4柴苓汤可下调CsA肾病大鼠肾组织中ColⅢmRNA及蛋白的表达,抑制胶原沉积,促进胶原降解,拮抗CsA肾病大鼠纤维化,减缓肾病进程。