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邻苯二甲酸酯(Phthalic Acid Esters,PAEs)作为增塑剂大量应用于生产生活并进入环境,严重威胁到生态环境安全和人体健康。环境中PAEs残留的高效降解已成为目前环境保护的迫切需要和研究热点。生物修复是环境治理的重要手段之一,即从污染环境中筛选高效降解微生物,利用它们对环境污染物进行生物降解。本研究从石油污染的土壤中分离纯化出一株邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(Di(2-ethylhexyl)Phthalate,DEHP)高效降解菌YC-JH1,该菌株能够将DEHP降解为无毒的邻苯二甲酸(Phthalic Acid,PA)和苯甲酸(Benzoic Acid,BA)。通过显微镜和透射电镜扫描观察菌株的形态特征,结合16S rDNA序列比对,鉴定菌株YC-JH1是一株戈登氏菌(Gordonia sp.)。研究环境因素对菌株YC-JH1降解DEHP的影响,结果显示,菌株YC-JH1能在20-40°C的温度范围和较宽的pH范围(6-12)内保持较高的降解活性,并能耐受高达13.5的pH和8%的盐,降解的最适条件为35-40°C、pH 10、不添加盐。菌株YC-JH1能够降解的DEHP最高浓度为1000 mg/L。降解底物谱分析发现,菌株YC-JH1能降解几乎所有的邻苯二甲酸酯,并且直侧链越长,降解效率越高。运用高效液相色谱-质谱联用技术分析YC-JH1降解DEHP的中间产物,推测DEHP降解的可能通路:YC-JH1依次断裂DEHP的两个酯键、PA脱羧,最终生成BA。蛋白定位实验表明,YC-JH1中负责降解PAEs第一个酯键的酶位于细胞内,并且在底物诱导下表达上调量不多,推测该酯酶可能是组成型表达蛋白。依据已报道的PAEs降解酯酶设计引物,在YC-JH1中克隆到一个邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(Mono(2-ethylhexyl)Phthalate,MEHP)水解酶,对该酶进行原核表达、纯化,并验证了其对MEHP的水解功能。