目的：　　重组lasota株新城疫病毒（recombinant avirulent NDV LaSota strain expressing the rabies virus glycoprotein，rL-RVG）具有抗肿瘤作用，有研究表明rL-RVG表达的狂犬病毒糖蛋白可以与乙酰胆碱受体结合起到阻断受体的作用。而乙酰胆碱受体在胃癌细胞转移、增殖中起到重要作用，在本实验中，我们探讨rL-RVG是否 通 过 拮 抗 α7 烟 碱 型 乙 酰 胆 碱 受 体 （ α7 nicotinic acetylcholine receptors ,α7-nAChR）影响胃癌细胞HGC的生长与凋亡。　　方法：　　1. 病毒感染细胞的鉴定　　运用Western Blot 检测被rL-RVG、NDV病毒感染的后HGC细胞株RVG、NDV蛋白的表达水平；　　2. rL-RVG 对HGC细胞的增殖影响　　将不同MOI 的rL-RVG、NDV感染HGC细胞，MTT 检验其抑制率,克隆实验检测病毒感染后的增殖情况。　　3. rL-RVG 对HGCα7-nAChR蛋白及凋亡相关蛋白的影响　　运用Western Blot 和免疫荧光的方法检验rL-RVG 、NDV感染HGC 后α7-nAChR的表达情况；通过Western Blot 检测凋亡蛋白cleaved caspase3的表达情况。　　4.α7-nAChR抑制剂、α7-nAChR siRNA及激动剂对rL-RVG 感染的HGC细胞的凋亡蛋白,p-AKT及α7-nAChR蛋白的影响　　在rL-RVG、NDV感染HGC 前给予α7-nAChR抑制剂甲基牛扁亭碱、α7-nAChR siRNA、α7-nAChR激动剂溴化乙酰胆碱进行干预，采用Western Blot分析cleaved caspase3、BCL-2、Bax、α7-nAChR及p-AKT蛋白的表达水平。　　5. α7-nAChR的抑制剂及激动剂对rL-RVG病毒感染后的细胞形态学变化的影响在rL-RVG、NDV感染HGC 前给予甲基牛扁亭碱、溴化乙酰胆碱进行干预，倒置显微镜下观察受病毒感染的细胞形态。　　6. α7-nAChR的抑制剂、α7-nAChR siRNA及激动剂对rL-RVG病毒感染后的细胞的凋亡情况的影响　　在rL-RVG、NDV感染HGC 前给予α7-nAChR的抑制剂、激动剂进行干预，采用tunel检测HGC细胞凋亡的情况。　　结果：　　1. Western Blot 发现 RVG蛋白的只在rL-RVG组表达，NDV蛋白在rL-RVG组及NDV组均表达。　　2. MOI 为10的rL-RVG 和NDV 病毒感染HGC 后，HGC 生长明显被抑制；rL-RVG组HGC细胞的增殖能力差。　　3. rL-RVG 感染HGC 细胞后，Western Blot 显示α7-nAChR、cleaved caspase3表达明显增加，免疫荧光显示α7-nAChR在rL-RVG组中明显高于NDV组和PBS组。　　4. Western Blot 显示经过α7-nAChR 抑制剂及α7-nAChR siRNA 预处理的NDV,PBS组的α7-nAChR蛋白、BCL-2/Bax、p-AKT表达明显下降、cleaved caspase3表达明显升高，而经过α7-nAChR抑制剂预处理的rL-RVG组与rL-RVG组差距不大,经过α7-nAChR siRNA预处理的rL-RVG组与与rL-RVG组相比较α7-nAChR表达量下降，其余蛋白差距不大；经过α7-nAChR激动剂预处理的NDV,PBS组的α7-nAChR、p-AKT、BCL-2/Bax明显升高，cleaved caspase3表达明显下降.　　5. 倒置显微镜下可见NDV+α7-nAChR抑制剂组、PBS+α7-nAChR抑制剂组HGC细胞分别较NDV组、PBS组皱缩、凋亡更明显，但rL-RVG组与其α7-nAChR抑制剂组相比细胞皱缩、凋亡差异不明显；rL-RVG+α7-nAChR激动剂组、NDV+α7-nAChR激动剂组、PBS+α7-nAChR激动剂组HGC细胞分别较rL-RVG组、NDV组、PBS组的细胞皱缩、凋亡明显减弱　　6. Tunel显示经过α7-nAChR抑制剂及激动剂预处理的NDV及PBS组，经过α7-nAChR抑制剂处理组的凋亡细胞高于未进行预处理的组及明显高于经过α7-nAChR激动剂处理的组。　　结论：　　本实验证实了rL-RVG感染HGC后稳定表达，rL-RVG 处理HGC 细胞后， rL-RVG拮抗了α7-nAChR进而抑制了HGC 细胞的生长增殖同时促进了HGC 细胞的凋亡，同时也证明了该机制与Bcl-2，AKT有关。