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目的:探讨理肺化纤方对体外培养的鼠肺成纤维细胞增殖及TGF-β1、TNF-α和IFN-Y表达的影响。
方法:1将20只青紫兰兔按随机数字表法分为5组,即生理盐水组、地塞米松组(3.15mg/Kg)、理肺化纤方低剂量组(2.2g/kg)、理肺化纤方中剂量组(4.4g/kg)和理肺化纤方高剂量组(8.8g/kg),每组4只,分别用生理盐水,地塞米松,低、中、高剂量理肺化纤方煎液灌胃3天后心脏采血,制备成五种对应名称含药血清。2 鼠肺成纤维细胞体外培养,将生长良好的.3-5代细胞按随机数字表法分为五组,即生理盐水血清组,地塞米松血清组和理肺化纤方低、中、高剂量药物血清组,各组细胞加入对应名称含药血清。MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组织化学法检测鼠肺成纤维细胞中TGF-β1、TNF-α及IFN-Y的表达。
结果:1 MTT可见理肺化纤方高、中剂量药物血清对鼠肺成纤维细胞在24小时抑制率分别为28%,12%,在48小时抑制率43%,16%,48小时后抑制率开始下降;与生理盐水血清组相比,理肺化纤方高、中剂量药物血清对鼠肺成纤维细胞增殖有明显的抑制作用(p<0.01),且理肺化纤方高剂量药物血清对鼠肺成纤维细胞的抑制率明显高于理肺化纤方中剂量药物血清对鼠肺成纤维细胞的抑制率(p<0.01),理肺化纤方低剂量药物血清组和生理盐水血清组相比没有差异P>0.05);2 FCM可见理肺化纤方高剂量药物血清可以促进鼠肺成纤维细胞凋亡:3免疫组织化学法测定可见生理盐水血清组胞浆有TGF-β1和TNF-α强表达,理肺化纤方低剂量药物血清组TGF-β1和TNF-α的表达较生理盐水血清组减弱,理肺化纤方高、中剂量药物血清组TGF-β1和TNF-α表达较生理盐水血清组明显减弱(P<0.01);IFN-Y在生理盐水血清组胞浆表达较弱,在理肺化纤方低剂量药物血清组表达较为明显,理肺化纤方高、中剂量药物血清组IFN-Y的表达明显增强(P<0.01)。
结论:1理肺化纤方可以抑制鼠肺成纤维细胞的增殖;2理肺化纤方可以促进鼠肺成纤维细胞凋亡;3理肺化纤方可以降低鼠肺成纤维细胞中II型细胞因子TGF-β1和TNF-α的表达,同时提高鼠肺成纤维细胞中I型细胞因子IFN-Y的表达。理肺化纤方可能是通过调整I型/II型细胞因子平衡而达到防治肺纤维化的目的。