蛋白和蛋白质糖链的相互作用在天然免疫和继发免疫中发挥重要作用，涉及病原微生物的识别和免疫细胞之间的相互作用，参与这种作用的分子为凝集素分子（ lectins），其中依赖钙离子的（C-type）凝集素家族（lectin family）为其主要成员。这一家族含有一个相似的功能结构域-糖基识别结构域（carbohydrate-recognition domains,CRDs）。基于胎肝cDNA大规模测序的完成，为寻找新的黏附分子，我们选中DC-SIGN，DC-SIGNR和CD23的氨基酸序列为模板，tBlastn搜索人胎肝cDNA数据库，找到一条具有较高同源性的EST：D1210，862bp。然后搜索NCBI的核酸库和EST库，发现其为一未知基因。采用RACE技术获得了其全长cDNA：1411bp, 编码293个氨基酸的蛋白。全长氨基酸序列与DC-SIGNR、DC-SIGN 和CD23有较高的同源性，分别为32％，31％和31％，命名为CD23L（CD23－like protein, CD23L）。 CD23L属于II型C型凝集素穿膜蛋白，N端含有一个较短的胞内结构域，一个穿膜部分和胞外部分组成；胞外由一个颈部含coiled-coil结构域和一个C末端CTLD（C-type lectin-like domain, CTLD）结构域组成，其蛋白结构域的构象和空间的分布与CD23、DC-SIGN和DC-SIGNR极为相似。CD23L基因定位于19p13.3， 与CD23、DC-SIGN、DC-SIGNR基因位于同一区105kb大小的染色体区域。CD23L基因位于CD23和DC-SIGN之间，从中心粒起，依次为CD23、CD23L、DC-SIGN和DC-SINGR，四个基因紧密成簇排列。这四个基因的基因结构分析表明他们的基因结构相似，CRD结构域分别由3′端三个外显子编码，呈现典型的C-type lectin的特点。不同的是编码胞外颈部coiled-coil结构域的外显子数目不同，但都保留亮氨酸拉链motif，其是形成多聚体的结构基础。重要的是CD23L的CTLD结构域中钙离子2结合位点氨基酸残基全部保守，而钙离子1结合位点氨基酸残基部分保守（2/4），并含有能识别甘露糖/N-乙酰葡萄糖胺的EPN motif。这四个基因具有相同的基因结构和紧密成簇存在于19p13.3区，及蛋白结构域的空间排列极为相<WP=6>似，说明他们是由一个祖先复制而来，并且进化树分析也支持这一结论。Northern Blot 显示CD23L在15种人组织中，只在胎肝、肝脏和淋巴结表达，而在心脏、大脑、肺、肾脏、骨骼肌、骨髓、脾脏、外周血白细胞、结肠、胸腺、小肠、胎盘组织未见表达。RT-PCR检测各种血细胞系、DC细胞、肝癌细胞株HepG2和BEL-7402、脐静脉内皮细胞、外周血单个核细胞和刺激的单个核细胞均未检测到CD23L的表达。为了原位检测CD23L的表达，我们制备了CD23L的多抗，通过Western Blot，间接免疫荧光和流式细胞计数仪检测稳定表达CD23L的CHO 细胞（CHO-CD23L）证实抗体的特异性，并且证实CD23L为II型膜蛋白，分子量为40kDa，以四聚体形式存在。免疫组织化学检测正常肝脏和淋巴结组织切片，发现CD23L主要在肝脏和淋巴结的窦状内皮细胞表达，并与DC-SIGNR共表达于同一细胞上。为了证实CD23L的糖基结合能力，我们用CD23L-Fc融合蛋白和CD23L的CHO稳定表达株（CHO-CD23L）细胞裂解液通过亲和层析的方法，发现CD23L能结合甘露糖，N-乙酰葡萄糖胺和岩藻糖，并依赖钙离子。因此，CD23L的生理功能可能是一种识别糖基的受体。此外，我们用复性的原核表达的CD23L膜外部分和真核表达的CD23L膜外部分与Fc的融合蛋白，应用流式的方法，筛选各种血细胞，发现CD23L能黏附T细胞，尤其是激活的T细胞；其黏附能被EDTA和甘露聚糖所抑制，说明CD23L黏附激活T细胞依赖钙离子，并需甘露糖一类的糖基参与，进一步证实CD23L是识别糖基的受体，其配体在激活T细胞上表达。为了进一步研究CD23L的功能，我们制备了CD23L单抗，流式筛选出两株特异性的单抗，为下一步功能研究打下了基础。CD23L的发现和其功能研究为肝和淋巴结窦内皮细胞的黏附功能和吞噬功能的分子机制打开了一扇认识的大门，也将为它们与其它内皮细胞具有不同的特性尤其是具有独特的免疫功能提供一些分子基础。