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寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是一种经由蚊媒传播的致畸性黄病毒,与新生儿的先天脑缺陷和成人的格林-巴利综合征有关,这种病毒也可以通过性传播;近来有研究报道ZIKV可在男性生殖器官中潜伏存在达6月以上,这给ZIKV的防治手段增加了负重,也给人类健康带来潜在威胁。目前对支持病毒复制和在人类睾丸中持续存在的相关研究少之又少。已有的研究主要是针对人睾丸支持细胞的体外感染,以及啮齿类、灵长类动物模型的研究,睾丸支持细胞(Sertolicell,SC)对男性生殖功能具有重要的调节和保护作用,在睾丸中是不可替代的一类细胞;且其本身也是ZIKV感染的重要靶细胞,故从睾丸支持细胞入手分析ZIKV感染规律对于后续ZIKV防治有指导性意义。但人原代睾丸支持细胞的获取和使用存在不便性,而啮齿类动物模型的建立需要做干扰素拮抗处理,可能无法如实的反映人的感染病症;灵长类模型对感染症状的模拟和人类相近,但成本偏高,故目前急需一种感染症状近似于人、获取方便、成本低的实验动物作为ZIKV潜伏感染的研究对象,以探究ZIKV对于雄性感染的基本规律及其可能机制。本研究以亲缘关系与人相近的树鼩作为研究对象,通过二步酶消化法以及定时换液法建立一套成熟的原代睾丸支持细胞体外分离培养技术,并通过抗体双染对分离细胞进行纯度检测,得到高质量的细胞后用以体外感染,以qRT-PCR的方式检测感染细胞中病毒载量变化,探究细胞水平上ZIKV感染规律;通过实时荧光定量PCR结合免疫荧光技术从一个与黄病毒感染密切相关的重要受体AXL入手,通过抑制剂的使用探究其在细胞模型上与ZIKV感染的关联性,及其可能发挥的作用。最终通过qRT-PCR检测在ZIKV在体内实验中表现出的感染规律,并通过流式细胞计数以及ELISA检测发现两个有望与ZIKV防治相关的免疫因子CD4及IFN-γ的表达情况,得到如下结果:1)利用树鼩获得了材料获取更为容易、分离步骤更为简化的树鼩睾丸原代支持细胞,并通过Vimentin/GATA-4两种抗体对所获细胞进行鉴定,收集到纯度较高的树鼩睾丸原代支持细胞;2)相比于ZIKV研究中常用的vero细胞、C6/36细胞中,ZIKV在SC体外40h内短时感染中表现为高水平复制,病毒入胞时间可能早于6h;ZIKV在SC上的高水平复制可在体外维持12天,在感染9天时SC胞外培养液中病毒载量明显下降;而ZIKV复制抑制剂BGJ398对SC的抑制作用不如AXL抑制剂R248,R248能显著降低ZIKV在SC中的复制水平,且剂量为30uM时,抑制效果最佳;3)ZIKV感染健康的5月龄雄性树鼩,在感染前三天出现病毒血症并造成少量脏器如脾、肝的组织病理变化,并在第2天睾丸和附睾两个生殖器官中高表达,载量水平达109copies/mg但7天以后在树鼩外周血及各组织脏器中均无法检测到病毒复制。感染树鼩在第3、5天表现CD4+T细胞数量大幅增加,第5天时CD4+T细胞数量水平最高,在淋巴细胞中占94%;感染后第5天IFN-γ表达量大幅增加,达15mg/mL。本研究利用原代细胞分离培养建立体外感染,观察到睾丸支持细胞对寨卡病毒感染高度敏感,这一过程可能与TAM家族受体AXL相关。在体内感染中,ZIKV在雄性树齣上的复制并不出现和人一样的潜伏现象,当中CD4+T和IFN-γ在感染中期的异常高表达可能是潜伏现象未能产生的关键点。这些发现为理解寨卡病毒如何在男性生殖道中存活提供了重要的见解,进而可能有助于开发抗病毒疗法或策略,将这种病原体的传播威胁降到最低。