【摘 要】
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目的:探讨DDR1对小鼠实验性结肠炎发生发展过程中巨噬细胞极化的影响。方法:实验中选用16只SPF级野生型雄性C57BL/6小鼠和16只SPF级DDR1-/-型雄性C57BL/6小鼠（6-8周龄,20±2g）。采用随机的方法将小鼠分为4组（每组8只）:野生型小鼠对照组（WT CON组）、野生型小鼠模型组（WT DSS组）、DDR1-/-型小鼠对照组(DDR1-/-CON组)和DDR1-/-型小鼠模
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目的:探讨DDR1对小鼠实验性结肠炎发生发展过程中巨噬细胞极化的影响。方法:实验中选用16只SPF级野生型雄性C57BL/6小鼠和16只SPF级DDR1-/-型雄性C57BL/6小鼠（6-8周龄,20±2g）。采用随机的方法将小鼠分为4组（每组8只）:野生型小鼠对照组（WT CON组）、野生型小鼠模型组（WT DSS组）、DDR1-/-型小鼠对照组(DDR1-/-CON组)和DDR1-/-型小鼠模型组(DDR1-/-DSS组)。模型组饮用3.5%DSS溶液,对照组饮用纯净水,连续饮用7天,期间自由饮食。实验过程中观察小鼠状态,对小鼠的体重变化、大便的性质、血便的情况等进行详细记录,计算小鼠疾病活动指数。实验第7天麻醉（1%戊巴比妥钠）小鼠后,用颈椎脱臼法处死小鼠,记录结肠长度、计算脾脏指数。并对结肠组织进行HE染色计算病理评分,免疫组化染色检测结肠组织中巨噬细胞标记物F4/80蛋白的表达,免疫荧光检测iNOS+、CD206+巨噬细胞的表达情况。提取小鼠肠道单个核细胞,用流式细胞术检测M1和M2巨噬细胞占总的巨噬细胞的比例,用qRT-PCR检测结肠组织的中IL-1β、iNOS、Arg1 mRNA的表达。结果:（1）野生型小鼠和DDR1-/-型小鼠造模后出现腹泻和血便,疾病活动指数评分升高,体重下降,肠道缩短,脾脏明显肿大,病理评分增高。在造模第6、7天,DDR1-/-DSS组和WT DSS组相比体重减轻程度小（92.27±5.12 vs 87.77±4.19、88.50±6.30 vs 79.81±5.94,p＜0.05）,在造模第7天,DDR1-/-DSS组和WT DSS组相比疾病活动指数评分低（10.00±1.31 vs 11.75±0.71,p＜0.05）。DDR1-/-DSS组与WT DSS组相比小鼠结肠长度更长（5.24±0.49 vs 4.55±0.41,p＜0.05）,脾脏指数更低（4.84±1.11 vs 6.60±1.93,p＜0.01）,病理评分更低（7.67±1.63 vs11.17±1.83,p＜0.01）。（2）免疫荧光法检测小鼠结肠组织中iNOS+巨噬细胞和CD206+巨噬细胞的表达情况,DDR1-/-DSS组结肠组织中iNOS+巨噬细胞的数量少于WT DSS组（2.83±0.29 vs 6.67±0.58,p＜0.05）,而DDR1-/-DSS组结肠组织中CD206+巨噬细胞的数量多于WT DSS组（7.33±0.76 vs 2.50±0.50,p＜0.01）。（3）流式细胞术检测小鼠结肠组织M1和M2巨噬细胞占总的巨噬细胞,DDR1-/-DSS组与WT DSS组相比肠道中M1巨噬细胞的比例降低（14.13±3.62vs 24.85±4.47,p＜0.01）,而M2巨噬细胞的比例升高（31.30±3.87 vs 21.55±2.39,p＜0.05）。（4）qRT-PCR结果:DDR1-/-DSS组和WT DSS组相比IL-1βmRNA表达更低（7.69±4.95 vs 35.00±18.14,p＜0.01）;DDR1-/-DSS组和WT DSS组相比iNOS mRNA表达更低（3.27±1.82 vs 6.52±2.60,p＜0.05）;DDR1-/-DSS组和WT DSS组相比Arg1 mRNA表达更高（16.42±6.36 vs 7.77±1.46,p＜0.05）。结论:（1）DDR1的敲除可以减轻小鼠实验性结肠炎;（2）DDR1的敲除在实验性结肠炎中影响了巨噬细胞的极化方向,抑制了巨噬细胞向M1极化,促进了巨噬细胞向M2极化。
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