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[目的]原发性肝细胞癌是世界上发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一,近年来我国的肝细胞癌诊治已经取得了很大的成绩。由于我国感染HBV、HCV的人群较多,肝细胞癌仍将是威胁国人健康的重大疾病,因此,探寻与肝细胞癌发生发展相关的基因是至关重要的问题.本课题旨在初步阐述hint1介导miRNA-455-5p/CD47在肝细胞癌中的作用机制,可望提供一个新的Hint1作用途径,从而调控肝癌细胞的侵袭、转移能力。[方法]1.在HepG2细胞中用siRNA敲除Hint1基因,用qPCR验证其敲除成功,同时引用划痕实验和Transwell实验测定敲除hint1的HepG2细胞的侵袭转移能力;2.采用基因芯片技术测定在Hint1敲除后高表达的mRNA;3.用qPCR测定CD47在被敲除hint1的HepG2细胞的表达,4.所采用的生物信息学软件为 TargetScan 6.2(网址为 www.targetscan.org)测定 CD47 为 miRNA-455-5p的靶蛋白,5.用qPCR测定敲除hint1的HepG2细胞中miRNA-455-5p的表达情况;6.用agomir过表达miRNA-455-5p,并用qPCR测定验证过表达成功;7.在敲除 hint1 的 HepG2 细胞,过表达 miRNA-455-5p 中用 western-blot 测定 CD47蛋白的表达,并用划痕实验,Transwell实验测试其侵袭转移能力。[结果]1.在敲除hint1基因的HepG2细胞中,qPCR显示hint1的表达降低,划痕实验和Transwell实验结果显示:细胞侵袭转移能力升高。2.基因芯片结果表明:CD47表达升高最明显;3.在敲除hint1基因的HepG2细胞中,qPCR显示CD47过表达;4,TargetScanF6.2显示mRNA的靶蛋白是CD47;5.在敲除hint1的HepG2细胞中miRNA-455-5p的表达情况降低。6.用agomir过表达miRNA-455-5p 后,qPCR 验证 miRNA-455-5p 的表达升高;7.在敲除 hint1 的HepG2细胞中,qPCR结果显示CD47表达下调,划痕实验、Transwell显示细胞侵袭、转移能力抑制。[结论]1敲减HINT1的HepG2细胞的侵袭转移能力增强。;2 HINT1通过调控CD47在肝癌细胞中发挥抑制HepG2细胞侵袭转移的作用;3 miRNA-455-5p通过抑制CD47抑制HepG2细胞细胞侵袭转移的作用;4 HINT1介导miR-455/CD47信号通路,抑制肝细胞癌迁移、侵袭能力