千金藤属植物地不容的生药学及化学成分研究

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地不容(Stephania epigaea Lo)为防己科千金藤属植物,主要分布于云南的西南部及东南部,生长于湿热河谷的石灰岩上,俗名山乌龟、地胆、金不换等,在植物分类学上属千金藤属山乌龟亚属,资源较为丰富。从该植物中分离得千金藤素、轮环藤宁碱、异紫堇定(isocorydine)和L-箭毒碱(L-Curine)等生物碱。其中千金藤素(Cepharanthine)具有抗结核、抗菌、抗麻风、抗肿瘤,升高白细胞及促进免疫功能等作用,千金藤素已列入云南省药品标准Q/WS 575-1978,其制剂为片剂;轮环藤宁碱(Cycleanine)具有抗炎、抗矽肺、解热镇痛和肌肉松弛等作用。本文对云南民族药地不容进行了生药学研究,并对其进行了总生物碱的提取工艺、TLC薄层色谱和HPLC分析等化学成分方面的研究。地不容的显微特点其嫩茎为:①表皮细胞一列,外被角质层,有气孔和单细胞的非腺毛。②表皮下有2~4层厚壁细胞形成厚壁组织,呈微波状排成一环。③维管束有限外韧型,为内外两轮,每个维管束被1~2层纤维包围成维管束鞘。④外轮维管束较小,大部分嵌于厚壁组织中。⑤内轮维管束较大,其初生木质部呈V形,原生木质部导管大多数在分化过程中遭破坏,四周的薄壁细胞互相分离,形成一个气隙,在V形的两臂上,各有一个后生的大型导管,韧皮部位于木质部外方,与木质部之间有1~2层厚壁细胞。⑥嫩茎的中内由薄壁细胞组成,随后中央及韧皮部附近的薄壁细胞逐渐分化成木质部,因此整个茎的硬度也近一步增大。块根为:横切面宽,木栓细胞10余列,略呈长方形,切向延长;皮层薄壁细胞不规则形,内含草酸钙小方晶或短梓晶,靠近木栓细胞内侧有单个或2~4个成群的石细胞散在;中柱占根的大部分,具三生构造,有多数外韧型的异常维管束排列成2~4个同心环状,中央有正常维管束,木质部导管旁有多数木纤维及少数管胞,呈放射状排列,薄壁细胞内含多数淀粉粒及草酸钙方晶。总生物碱的提取工艺采用正交设计法,以总生物碱提取率为考察指标,通过对乙醇浓度、溶媒比、超声波提取时间、回流时间4因素进行考察,确定最佳提取工艺为:75%乙醇为提取溶剂,溶媒比(乙醇:地不容)为12,先超声提取60 min,再回流提取1 h,共回流提取2次为地不容总生物碱提取的最佳条件。生物碱的鉴定和含量测定在生药学鉴定的同时采用薄层色谱分离方法,对地不容的氯仿萃取物以硅胶G为固定相,苯—氯仿—甲醇—氨水(85:5:10:2)为展开剂,得到3个分离点;综合比较千金藤素和轮环宁碱对照品与测试品的斑点形状、颜色和Rf值等指标可以初步判断地不容中含有和对照品相同的生物碱。在TLC分析的基础上进一步采用RP-HPLC法对地不容进行分析,在色谱条件为流动相:甲醇-水-三乙胺(77:23:0.20);流速为1.0mL.min-1;紫外检测波长为282nm;灵敏度0.08Aufs,柱温为30℃;进样量:20uL;在以上色谱条件下测得千金藤素和轮环藤宁碱的含量分别为:3.57mg/g和2.31mg/g。鉴于国内外对地不容的相关研究报道甚少,本文比较全面地介绍了地不容生药学、化学成分等方面的研究方法和结果,对于从事千金藤属植物及其类似植物的科研工作者有一定的参考价值。
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