【摘 要】
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目的:观察下丘脑外侧区（LHA）-伏隔核壳部（NAcSh）orexin-A神经通路的构成,探讨该通路对普通饮食与高脂饮食大鼠NAc胃牵张（GD）反应性神经元放电、胃运动、分泌功能的影响以及对奖赏性摄食的调控作用。方法:建立高脂饮食大鼠模型:选取雄性健康Wistar大鼠（体质量180-200 g）,高脂饲料（含蛋白质20%,糖类20%,脂肪60%）饲喂6 w。采用荧光金逆行追踪结合荧光免疫组织化学染
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目的:观察下丘脑外侧区（LHA）-伏隔核壳部（NAcSh）orexin-A神经通路的构成,探讨该通路对普通饮食与高脂饮食大鼠NAc胃牵张（GD）反应性神经元放电、胃运动、分泌功能的影响以及对奖赏性摄食的调控作用。方法:建立高脂饮食大鼠模型:选取雄性健康Wistar大鼠（体质量180-200 g）,高脂饲料（含蛋白质20%,糖类20%,脂肪60%）饲喂6 w。采用荧光金逆行追踪结合荧光免疫组织化学染色技术观察orexin-A神经元从LHA到NAcSh的投射,比较普通饮食及高脂饮食大鼠LHA内orexin-A及NAcSh内orexin-A受体1（OX1R）免疫阳性细胞的表达差异。采用脑核团置管术和微量注射方法,观察orexin-A对普通饮食和高脂饮食大鼠NAcSh内GD反应性神经元放电、胃运动、分泌功能及奖赏性摄食行为的影响。采用核团电刺激的方法,观察电刺激LHA对普通饮食和高脂饮食大鼠NAcSh内GD反应性神经元放电、胃运动、分泌功能及奖赏性摄食行为的作用,并观察NAcSh预先给予OX1R阻断剂SB334867对该作用的影响。结果:荧光金（FG）逆行追踪结合荧光免疫组织化学染色结果显示,NAcSh微量注射FG,7 d后可在LHA发现FG标记的神经元,将同一切片进行orexin-A免疫组织化学染色,发现LHA内有orexin-A免疫阳性神经元的表达,并且部分orexin-A免疫阳性细胞可与FG共标记。此外,与普通饮食大鼠相比,高脂饮食大鼠LHA内orexin-A免疫阳性细胞表达并无显著差异（P>0.05）,而NAcSh内OX1R表达显著增多（P<0.05）。电生理研究结果显示,在NAcSh微量注射orexin-A,普通饮食和高脂饮食大鼠NAcSh内胃牵张兴奋性神经元（GD-E）和胃牵张抑制性神经元（GD-I）放电频率均显著升高（P<0.05）,且高脂饮食大鼠放电频率变化率显著高于普通饮食大鼠（P<0.05）;若预先在NAcSh微量注射orexin-A受体1（OX1R）阻断剂SB334867再给予orexin-A,orexin-A对GD神经元的兴奋作用可被完全阻断（P<0.05）。电刺激LHA可使大鼠NAcSh内GD-E和GD-I神经元放电频率均显著升高（P<0.05）,而预先在NAcSh给予SB334867可部分阻断电刺激LHA对GD反应性神经元的影响（P<0.05）。在体胃运动结果显示,大鼠NAcSh微量注射orexin-A或电刺激LHA,胃收缩的幅度及频率均显著增加（P<0.05）,且该效应可被NAcSh预注射SB334867阻断（P<0.05）。与普通饮食大鼠相比,高脂饮食大鼠胃收缩的幅度及频率变化率显著增加（P<0.05）。胃排空研究结果显示,NAcSh微量注射orexin-A或电刺激LHA,大鼠的胃排空均显著增加（P<0.05）,且高脂饮食大鼠的胃排空变化率显著高于普通饮食大鼠（P<0.05）。NAcSh微量注射orexin-A或电刺激LHA的促胃排空效应可被NAcSh预注射SB334867阻断（P<0.05）。胃酸分泌结果显示,NAcSh微量注射orexin-A或电刺激LHA均可使胃酸分泌量显著增加（P<0.05）,这些促分泌作用亦可被NAcSh预注射SB334867所阻断（P<0.05）。而高脂饮食大鼠胃酸分泌量与普通饮食大鼠无显著性差异（P>0.05）。与奖赏性摄食相关的条件性位置偏爱（CPP）实验结果显示,与普通饮食大鼠相比,NAcSh微量注射orexin-A后高脂饮食大鼠于放置可口食物隔间的停留时间更长（P<0.05）,而电刺激LHA对普通饮食和高脂饮食大鼠的影响无显著差异（P>0.05）;可口食物（SCM）的摄入研究结果显示,NAcSh微量注射orexin-A或电刺激LHA,普通饮食与高脂饮食大鼠的SCM摄入量均显著增加（P<0.05）,且高脂饮食大鼠摄入量比普通饮食大鼠摄入量显著增多（P<0.05）。这些促进作用亦可被NAcSh预注射SB334867所阻断（P<0.05）。结论:从LHA到NAcSh存在Orexin-A能神经通路,其可参与大鼠NAcSh内GD神经元兴奋性、胃运动分泌功能和奖赏性摄食的调控。这些调控作用可能是通过NAcSh中的OX1R信号通路实现的,且对高脂饮食大鼠胃运动和可口食物摄入量影响更为显著,可能与高脂饮食大鼠NAcSh中OX1R表达增加有关。
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