酵母Whi2蛋白及其人类同源蛋白KCTD对TORC1信号通路的调节机制

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目的:研究酵母Whi2蛋白对氨基酸介导的TORC1信号通路的调节机制,及其人类同源蛋白KCTD对哺乳动物TORC1(mTORC1)的调节机制。方法:采用酵母生长实验比较不同菌株的生长情况;通过免疫印迹法检测核糖体蛋白S6的磷酸化水平,考察酵母的TORC1活性;氧气消耗实验检测不同菌株的耗氧量;在氨基酸缺乏条件下检测内源性Whi2-TAP的表达;通过转入prATG8-GFP-ATG8质粒检测Whi2蛋白对自噬的影响;免疫荧光法观察各KCTD蛋白的表达及表征;哺乳动物细胞的氨基酸缺乏及再刺激处理实验筛选
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