IL-6在肝细胞性肝癌中的差异表达及与乙肝病毒相关性研究

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目的:肝细胞性肝癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是肝癌发生的重要危险因素,但其如何导致肝癌发生的确切机制尚不清楚。慢性炎症与肿瘤相互关系一直是肿瘤生物学领域研究的热点之一。白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)作为一种重要的炎性因子参与了多种炎症、免疫反应过程,在肿瘤微环境中发挥重要作用,与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究通过对肝癌患者临床信息及肝癌标本研究,验证IL-6在肝癌组织及癌旁组织中的表达情况,初步探索IL-6在肝癌组织及癌旁组织中表达异同及乙肝阳性对IL-6表达的影响。方法:采用IPA分析方法对mi RNA进行靶基因预测,探索潜在相关通路与乙肝阳性肝癌密切联系。通过TCGA数据库内肝癌样本数据分析,预测IL-6在肝癌中的表达情况。通过回顾性分析肝细胞性肝癌患者的病例,筛选出其中符合研究标准的病例共37例。收集病例的临床病理资料,统计并分析病人的各项临床指标。采用q RT-PCR技术及免疫组化技术来分析IL-6在肿瘤组织和癌旁组织中的表达情况,探讨IL-6m RNA在癌旁组织中的表达情况与患者一系列相关临床信息是否存在联系。比较IL-6在HBV阳性组和HBV阴性组中的m RNA水平和蛋白表达水平是否存在差异。结果:在IPA分析中,IL-6信号通路在|Z-score|≥0的信号通路中显著富集排名第一。TCGA数据库数据分析,IL-6在癌旁组织内m RNA水平表达高于在肝癌组织内表达的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。在q RT-PCR实验中,IL-6 m RNA表达量在肝癌组织中比在癌旁组织中明显增高,两者差异存在统计学意义(p<0.05)。在癌旁组织中IL-6 m RNA的表达水平与患者肿瘤的大小有关(p<0.05,r>0),与患者的年龄,性别,肿瘤数目,是否存在门脉癌栓,是否肝硬化,CNLC分期、血清AFP等均无相关性(p>0.05)。IL-6m RNA在肝癌中的表达与HBV阳性无相关性(p>0.05)。与HBV-DNA阴性组相比,在HBV-DNA阳性组的肝癌组织中IL-6 m RNA的表达下调,差异有统计学意义(p<0.05)。与HBV阳性肝转氨酶正常组和HBV阴性肝转氨酶正常组相比,在HBV阳性肝功能异常组的IL-6 m RNA的相对差异表达量上调,差异有统计学意义(p<0.05)。在免疫组化实验中,IL-6蛋白在癌旁组织中的阳性表达率明显高于肝癌组织,差异有统计学意义(2=35.764,P<0.01)。IL-6蛋白在肝癌中的表达与HBV阳性,HBV-DNA阳性及肝转氨酶水平均无相关性(p>0.05)。结论:IL-6信号通路可能与乙肝感染及肝癌的发生发展有密切关系。与肝癌组织相比,IL-6在癌旁组织中的m RNA水平和蛋白水平表达上调,且IL-6 m RNA在癌旁组织中的表达与肿瘤大小有关。IL-6 m RNA在肝癌组织中的表达与HBV-DNA的复制水平呈负相关性,肝转氨酶水平与IL-6 m RNA在肝癌中的相对差异量呈正相关性。这些结果提示IL-6可能通过潜在的通路机制介导肝癌的发生发展。
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