【摘 要】
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目的:探讨嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia muciniphila,以下简称为A.muciniphila）对腺嘌呤诱导的慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）大鼠肾功能的保护作用,其机制可能与A.muciniphila对肠道屏障的改善有关。方法:培养A.muciniphila株;选取SPF级SD大鼠26只,6周龄左右,雌雄各半,标准饲料喂养,随机分为3组:正常组
【基金项目】
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山西省自然科学基金（201901D111433）A.muciniphila ermansia 菌通过维护慢性肾病大鼠肠道屏障功能改善肾功能的作用机制研究; 山西省人民医院肾脏内科136工程（2019003）
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目的:探讨嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia muciniphila,以下简称为A.muciniphila）对腺嘌呤诱导的慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）大鼠肾功能的保护作用,其机制可能与A.muciniphila对肠道屏障的改善有关。方法:培养A.muciniphila株;选取SPF级SD大鼠26只,6周龄左右,雌雄各半,标准饲料喂养,随机分为3组:正常组（8只）、CKD组（8只）、实验组（10只）。正常组:灌胃0.9%氯化钠注射液1ml/d,共4周;CKD组:灌胃腺嘌呤200mg/（kg·d）,共4周;实验组:同时灌胃腺嘌呤200mg/（kg·d）及A.muciniphila 1.5×10~9CFU/d,共4周。实验期间观察大鼠精神状态、每周测量体重。4周后使用10%水合氯醛腹腔注射麻醉,心脏穿刺采取大鼠血清,以下腹部正中切口入腹,切除左侧肾组织称重、同一节段结肠组织,-80℃冻存待检。收集大鼠血清检测血肌酐（Serum creatinine,Scr）、血尿素氮（Blood urea nitrogen,BUN）,评估肾功能。马松染色（Masson染色）观察肾组织间质纤维化情况,过碘酸希夫（Periodic Acid-Schiff stain,PAS）染色观察肾组织肾小管基膜厚度。Western blot法检测结肠组织紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达。同时免疫组化染色观察大鼠结肠组织紧密连接蛋白的表达。PAS染色观察结肠组织黏液层厚度以及杯状细胞数量。结果:与正常组比较,腺嘌呤诱导的CKD组大鼠血肌酐、血尿素氮均升高（P＜0.01）,实验组大鼠血肌酐、血尿素氮均低于CKD组（P＜0.01）。肾脏组织Masson染色及PAS染色结果表明,与正常组比较,CKD组大鼠肾组织间质纤维化程度严重,肾小管扩张,可见部分炎性细胞浸润（P＜0.01）;与CKD组比较,经A.muciniphila干预的实验组大鼠肾间质纤维化及肾小管扩张程度减轻（P＜0.05）。结肠组织Western blot法及免疫组化结果表明,CKD组大鼠紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达量较正常组减少（P＜0.05）,而A.muciniphila干预的实验组大鼠上述蛋白的表达量均高于CKD组（P＜0.05）。结肠组织PAS染色结果表明,与正常组比较,CKD组大鼠结肠腺体萎缩、变形,黏液层厚度明显减低,杯状细胞计数明显减少（P＜0.01）;与CKD组比较,实验组大鼠结肠组织黏液层厚度增加（P＜0.05）、杯状细胞计数增多（P＜0.01）。结论:A.muciniphila可改善慢性肾脏病大鼠的肾功能及肾间质纤维化,其机制可能与A.muciniphila保护肠道屏障功能有关。
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