论文部分内容阅读
目的:明确腺苷A2a受体是否参与艾灸的镇痛作用。方法:选取成年雌雄各半C57BL/6J小鼠,筛选出痛阈稳定的小鼠,随机分为空白组、造模组。造模组小鼠给予完全弗氏佐剂(Complete Freund’s adjuvant,CFA)于右足底注射20μL诱导炎症痛模型。造模后第4天,将造模组小鼠随机分为模型组、模型+CGS21680(腺苷A2a受体激动剂)组、模型+SCH58261(腺苷A2a受体拮抗剂)组、模灸组、模灸+CGS21680组、模灸+SCH58261组。我们于模型+CGS21680组、模型+SCH58261组小鼠的右侧“足三里”处分别注射CGS21680或SCH58261后,捆绑15 min;于模灸组小鼠“足三里”穴位处行温和灸15 min;于模灸+CGS21680组、模灸+SCH58261组小鼠“足三里”处局部采用激动剂或拮抗剂注射后立即进行温和灸干预,方法同前一致。痛阈测定分别在造模前、造模后第4天(艾灸干预前)、艾灸干预结束后0 min、30 min、60 min、90 min、120 min用PL-200热刺痛仪测定小鼠右后足底中部位置,记录热痛阈值;采用实时荧光定量PCR技术检测下丘脑A2aR mRNA表达;运用SPSS23.0、GraphPad Prism 6统计软件对实验数据进行统计分析处理。结果:1.艾灸“足三里”穴对炎症痛模型小鼠的镇痛效应与空白组比较,模型组小鼠痛阈值在各时间点均降低(P<0.05);与模型组比较,模灸组小鼠艾灸结束后痛阈值升高。其中,灸后0~90 min内痛阈值升高显著(P<0.05),灸后30 min达到峰值,后逐渐下降,灸后120 min时降至模型组水平。2.激动或拮抗穴位局部腺苷A2a受体对艾灸镇痛效应的影响(1)激动与拮抗“足三里”处腺苷A2a受体对炎症痛小鼠痛阈值的影响:运用CGS21680激动模型鼠“足三里”处腺苷A2a受体后,与模型组比较,热痛阈值下降,在0~90 min显著降低(P<0.05)。运用SCH58261拮抗模型鼠“足三里”处腺苷A2a受体后,与模型组比较,痛阈升高但维持时间短暂,只在注射后的0 min显著升高(P<0.05)。(2)穴位局部腺苷A2a受体激动后的艾灸镇痛效应:(1)与模灸组比较,模灸+CGS21680组在艾灸结束后0~120 min内痛阈值均显著下降(P<0.05)。(2)模灸+CGS21680组灸后30min、90min痛阈较模型+CGS21680组有升高趋势,艾灸后0 min、60 min痛阈值显著升高(P<0.05)。(3)穴位局部腺苷A2a受体拮抗后的艾灸镇痛效应:(1)与模灸组比较,模灸+SCH58261组痛阈值在艾灸结束后0 min时显著增高(P<0.05),之后热痛阈值逐渐降低,至灸后60~120 min时降至模型组水平。(2)与模型+SCH58261组比较,模灸+SCH58261组痛阈升高,在灸后0 min时虽低于模型+SCH58261组,但差异无统计学意义(P>0.05),在30 min时高于模型+SCH58261组(P<0.05)。3.下丘脑腺苷A2a R mRNA表达的变化结果:与空白组比较,模型组下丘脑腺苷A2aR mRNA表达显著下调(P<0.05)。与模型组比较,模灸组下丘脑腺苷A2aR mRNA表达显著上调(P<0.05)。结论:1.艾灸对CFA诱导的炎症痛模型小鼠有镇痛效应;2.局部腺苷A2a受体参与艾灸镇痛;1)激活穴位局部腺苷A2a受体可阻断艾灸镇痛效应;2)拮抗穴位局部腺苷A2a受体可增强艾灸镇痛效应。3.下丘脑腺苷A2a受体可能参与艾灸镇痛。