背景食管癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,我国是食管癌的高发地区,发病总数占全球食管癌46.6%,并且在我国发病率还在逐年攀升,其死亡率在恶性肿瘤中排名第4位。食管癌的发病有一个很显著的特点,就是有明显的地域差异。高发的地区发病率最高可达到千分之二左右,而低发的地区发病率只有十万分之三。在全球范围内,以中亚、日本、非洲、南美洲和法国北部为高发区。在我国范围内,则以太行山区、大别山区、苏北地区、秦岭东部地区、广东潮汕地区、闽南地区以及四川北部地区为高发区。其中,在我省安阳市林县,食管癌的发病率和死亡率居各种恶性肿瘤首位。近几十年由于采取了一些针对食管癌的预防措施,我国食管癌高发区发病率有所下降。从病因上来说,食管癌的病因尚未明确,但已提出的有:1.亚硝胺和真菌。食管上皮增生性改变与亚硝胺化合物密切相关,而此类化合物的致癌性已经明确。有些真菌可以将硝酸盐还原成亚硝胺盐,使其具有致癌性,甚至有些真菌可以自己产生亚硝胺盐。2.饮食习惯。食管癌与进食过热、过快或进食粗糙食物有关,可能与这些因素引起的炎性反应或损伤食管上皮有关。此外,有人提出吸烟和饮酒也是引起食管癌的因素之一。3.微量元素摄入不足和营养不良。微量元素在食管鳞癌高发区的饮食中缺少,比如钼、铁、锌、氟等在饮食和饮水中含量均偏低;维生素A、维生素B和维生素C的缺乏;尤其是动物蛋白、新鲜蔬菜、水果摄入量不足,食管癌高发区患者的功能特点。4.遗传。食管癌具有十分明显的家族聚集现象,在这些食管癌高发家族中,存在染色体数目或者结构上的突变或异常。从目前的研究来看,食管癌的发生和发展可能与C-MYC、EGFR等多个癌基因以及基因卫士p53的突变或丢失有关。5.其他因素。食管癌可能与慢性炎症有关,众所周知的胃食管反流病引起的Barrett食管就可癌变,甚至发展为食管腺癌。从病理学上,食管癌分为鳞癌和腺癌,在欧美及西方国家腺癌占百分之八十,而在我国鳞癌占百分之九十。目前,对于食管癌的治疗方法十分有限,由于食管癌患者一般出现症状比较晚,一经发现多数已经进展,所以手术治疗仍然是当下最主要的治疗方式。食管癌患者总体生存率并不高,在百分之十八至二十五之间。而在早期发现切除后的生存率可达百分之九十以上。但是,治疗方式过于单一也限制了食管癌患者的生存率。因此,除了强调早期发现,早期治疗外,研究其他的治疗方法也成为了当前最重要的任务。鉴于食管癌属于恶性肿瘤的一种,同时也是蛋白和基因水平引发的疾病,因此研究和寻找新的基因靶点也成为当下医学的研究热点。生长抑制因子家族(inhibitor of growth,ING)由5个成员构成(ING1,ING2,ING3,ING4,ING5)。生长抑制因子家族成员蛋白包含核定位序列(nuclear localization signal,NLS)和C端的植物同源结构域(plant homeodomain,PHD)。早在1997年,已有研究确认ING1蛋白。此后,ING2,ING3,ING4,ING5蛋白相继被确认。ING蛋白家族在细胞增殖、凋亡、基因转录、DNA修复、细胞周期、细胞迁移和侵袭、肿瘤转移和血管生成等过程的信号传导通路中起着关键的作用。目前已有大量研究表明,ING家族蛋白在神经胶质瘤、胃癌、乳腺癌、肺癌、头颈部鳞状细胞癌和恶性黑色素细胞瘤中阻碍肿瘤进展。ING2作为生长抑制因子家族中的一员,定位于人染色体4q35,编码的蛋白质由280个氨基酸质组成,参与细胞周期阻滞、DNA修复,调控细胞增殖以及转录等多种基因调控的信号通路。在肿瘤中,既能起到抑癌作用,也能促进肿瘤的进展。已有研究证明,ING2在维持基因组稳定性方面起关键作用,在多种类型的肿瘤研究中发现了有ING2基因丢失的现象。研究者认为,由于受到某种损伤导致ING2结合位点丢失,引起基因组的不稳定,导致了基因功能紊乱,导致肿瘤发生,也就是说,ING2可能是参与肿瘤发生的起始事件,后来也有研究证实,在非小细胞肺癌患者中有很大的比例中ING2是丢失的,也佐证了这一观点。另外,近年来有研究表明,异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)可将ING2从Sin3A/HDAC复合体中分离出来,并抑制结肠癌的侵袭和转移。他们推测ING2可能结合于MMP13启动子上的RBPl-mSin3A—HDAC复合物并募集去乙酰化酶(SIRT)1抑制RBPl相关的mSin3A-HDACl的转录抑制活性,引起MMP13的上调从而增强结直肠癌的侵袭性和转移性。而ING2与食管癌的关系国内外并没有大宗研究,其在食管癌中的作用和机制也并不明确。目的探讨人食管鳞状细胞癌中生长抑制因子2(ING2)的表达及其临床意义。方法经免疫组化检测食管鳞状细胞癌癌组织和正常组织中ING2蛋白的表达,采用Wilcoxon非参数秩和检验分析其表达水平,并通过卡方检验其与临床病理特征的相关性。实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法分析食管鳞状细胞癌癌组织和正常组织中ING2表达的水平。采用Kaplan-Meier方法分析ING2的表达与食管鳞状细胞癌患者生存期之间的关系,两组曲线的比较用Log-rank(时序)检验。采用Cox风险比例模型分析各个协变量的联合效应。结果1.应用免疫组化的方法检测ING2在食管鳞癌中的表达:ING2在食管鳞癌中的细胞核及细胞质中呈高表达,而在癌旁组织中呈低表达,且只在细胞核中表达。ING2在食管鳞癌中表达蛋白染色指数(`x±S=10.250±3.7918)远远高于癌旁组织中蛋白染色指数(`x±S=1.368±0.6840),差异具有统计学意义(t=25.980,P=0.01)。应用c2检验分析比较食管鳞癌中ING2的表达与临床病理特征关系:ING2表达与饮酒、分化程度以及淋巴结转移均明显相关(P<0.05);与性别、年龄、吸烟、肿瘤大小、浸润深度无明显相关。2.RT-qPCR结果显示食管鳞状细胞癌中ING2mRNA表达(`x±S=1.253±0.486)高于正常食管组织中的表达(x±S=0.575±0.139),差异具有统计学意义(P<0.05)。3.ING2与食管鳞癌预后的相关性:Kaplan-Meier生存曲线显示ING2的表达量与食管癌根治术后患者总生存时间明显相关,ING2高表达存活时间比低表达更短(P<0.05),本研究中,ING2低表达组5年生存率为52.6%,而高表达组5年生存率仅为22.7%,食管鳞癌中ING2高表达的患者预示着预后更差。此外,通过COX模型多因素分析,ING2高表达(P=0.042)与淋巴结转移(P<0.001)是食管癌的独立预后不良因素。结论ING2在食管鳞癌中高表达,并且分化程度越低,ING2表达越高,而在正常食管组织中低表达。多因素分析和生存分析提示ING2与预后明显相关。