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柯萨奇B组病毒(coxsackievirusgroupB，CVB)是人类病毒性心肌炎(viralmyocarditis，VMC)的主要病原。研究证明，约有25％CVB性心肌炎最终演变为扩张型心肌病(dilatedcardiomyopathy，DCM)。目前临床对CVB感染尚无特异、有效的治疗措施。近年来，一氧化氮(nitricoxide，NO)的抗病毒作用受到了广泛的关注。本研究从体外和体内两方面来研究有机硝酸脂类NO供体药物硝酸甘油(glyceryltrinatrate，GTN)和硝酸异山梨酯(isosorbidedinitrate，ISDN)抗柯萨奇B组3型病毒的作用，为GTN和ISDN今后在抗CVB性心肌疾病的临床应用提供实验依据。
方法用HeLa细胞扩增并收获柯萨奇B组3型病毒(CVB3)后，测定CVB3的半数组织培养感染剂量(TCID50)和空斑形成单位(PFU)，应用MTT法测定实验所用药物的细胞毒性，用细胞病变效应(CPE)抑制实验和空斑形成抑制实验，观察和分析研究GTN、ISDN对CVB3的抑制作用；应用GTN不同给药次数的CPE抑制实验、GTN在HeLa细胞中代谢产生NO的浓度测定及NO浓度与GTN的细胞病变效应抑制结果间相关性分析，来分析GTN的抗病毒作用机制。BALB/c小鼠腹腔注射5000TCID50的CVB3，同时给予GTN和ISDN，14天后处死小鼠，取心脏做常规组织病理学检查。
结果：GTN、ISDN可以明显抑制CVB3的细胞病变效应，GTN的抑制率可达68％，ISDN为46％，组间差异显著(P＜0.05)。GTN、ISDN可明显抑制CVB3的空斑形成，GTN空斑形成抑制率可达100％，ISDN为80％，与对照组比较差异显著(P＜0.05)；GTN不同给药次数的CPE抑制实验表明各组间抗病毒作用的差异无显著性(一次给予GTN的OD490值为0.61±0.062，两次为0.601±0.027，三次为0.652±0.078，P＞0.05)，GTN在HeLa细胞中代谢产生NO浓度随作用时间的增加而增加(0小时为0.3±0.72mmol/L，24小时则为12.1±0mmol/L，P＜0.05)，NO浓度与GTN的细胞病变抑制效应呈高度正相关(r=0.947，P＜0.01)。用GTN、ISDN保护的小鼠心肌病理标本每视野(×100)病灶数明显低于病毒对照组，GTN组为0.89±0.18，ISDN组为1.25±0.22，与病毒对照组差异显著(P＜0.05)。
结论GTN、ISDN等临床常用于抗心绞痛的硝酸酯类药物具有明确的抗CVB3感染HeLa细胞和BALB/c小鼠心肌细胞的作用，其抗病毒机制是通过释放NO来实现的。