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目的:我们前期实验表明,二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)通过阻断Rac1-Pak1/Rock通路下调LIMK1抑制人胃癌MGC803细胞的迁移与侵袭。近来蛋白组学发现,DADS可下调Rho GDI2蛋白。本研究在前期研究基础上,通过构建Rho GDI2稳定高表达MGC803细胞系,探讨DADS对Rho GDI2高表达MGC803细胞生物学行为的影响。方法:将p IRES2-EGFP-Rho GDI2真核表达载体转染MGC803细胞,构建Rho GDI2稳定高表达MGC803细胞系。Western blot验证Rho GDI2蛋白的表达水平。划痕实验与Transwell侵袭实验检测DADS对Rho GDI2高表达MGC803细胞迁移侵袭的影响。裸鼠成瘤实验检测DADS对Rho GDI2高表达MGC803细胞移植瘤生长的影响。结果:1.成功建立Rho GDI2稳定高表达的MGC803细胞系。两组转染细胞(Rho GDI2/MGC803与p IRES2-EGFP/MGC803)均可见绿色荧光。Western blot显示,Rho GDI2/MGC803细胞中Rho GDI2的蛋白表达量均明显高于p IRES2-EGFP/MGC803及MGC803细胞,证明成功构建Rho GDI2稳定高表达的MGC803细胞系。2.DADS对Rho GDI2高表达MGC803细胞迁移的影响。划痕实验显示,Rho GDI2/MGC803组的划痕距离小于p IRES2-EGFP/MGC803组和MGC803组(P<0.05),表明Rho GDI2高表达促进MGC803细胞的迁移。DADS处理24h的MGC803组、空载体组、Rho GDI2高表达组的划痕距离明显分别大于相对应的DADS未处理组(P<0.05),表明DADS抑制MGC803、Rho GDI2/MGC803的迁移。3.DADS对Rho GDI2高表达MGC803细胞侵袭的影响。侵袭实验显示,Rho GDI2高表达组穿膜细胞数显著多于MGC803组和空载体组(P<0.05),表明Rho GDI2高表达促进MGC803细胞的侵袭。DADS处理24h后的MGC803组、空载体组、Rho GDI2高表达组的穿膜细胞数明显小于DADS未处理的相对应各组(P<0.05),表明DADS抑制MGC803、Rho GDI2/MGC803的侵袭。4.DADS对Rho GDI2高表达MGC803细胞成瘤能力的影响。裸鼠成瘤实验显示,MGC803组移植瘤生长速度慢于Rho GDI2高表达组(P<0.05),Rho GDI2高表达可促进MGC803细胞移植瘤的生长能力。DADS处理组的移植瘤生长速度显著慢于未处理组(P<0.05),表明DADS可抑制MGC803组与Rho GDI2高表达组移植瘤生长。移植瘤免疫组化显示,DADS处理组较相应的未处理组,E-cadherin表达量增多,Vimentin、Ki-67、CD34的表达量减少;Rho GDI2高表达组较MGC803组的Vimentin、Ki-67、CD34的表达量增多,E-cadherin的表达量减少。结论:1.DADS可抑制Rho GDI2高表达MGC803细胞迁移侵袭与成瘤能力。2.Rho GDI2高表达促进MGC803细胞迁移侵袭及成瘤能力。