基于LIF/STAT3信号通路探讨补肾活血法对促排卵子宫内膜容受性的改善作用

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目的:1.首先建立大鼠超促排卵模型,以补肾活血法进行干预,探讨白血病抑制因子(LIF)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路与子宫内膜容受性的相关性。2.建立大鼠超促排卵受孕模型,以补肾活血法进行干预,研究补肾活血法对受孕大鼠子宫内膜容受性的影响。检测LIF/STAT3信号通路相关分子的变化,探讨补肾活血法的作用靶点,以阐明中医药改善子宫内膜容受性治疗不孕症的作用环节,为中医药在辅助生殖技术中的应用提供科学依据。3.观察补肾活血法改善肾虚血瘀型多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者促排卵周期中子宫内膜容受性的临床疗效,证明补肾活血法能够增加促排卵周期中PCOS患者子宫内膜厚度,改善子宫内膜类型,提高妊娠率。方法:1.以促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)+孕马血清促性腺激素(PMSG)+注射用绒促性素(HCG)建立大鼠超促排卵模型,通过HE染色,光镜下观察子宫内膜厚度;免疫组化法检测大鼠子宫内膜微血管密度(MVD)、整合素β3、LIF、STAT3、p-STAT3。2.以GnRHa+PMSG+HCG建立大鼠超促排卵模型,同时于注射HCG后雌雄2:1合笼,有阴栓者为受孕。免疫组化法检测大鼠子宫内膜MVD、整合素β3、LIF、STAT3、p-STAT3。3.临床研究中以克罗米芬(CC)+HCG为促排卵方案,采用经阴道彩色多普勒超声检测卵泡成熟日子宫内膜厚度及类型,同时比较妊娠率。结果:1.未孕大鼠子宫内膜HE染色后厚度比较动情后期正常组及中药组大鼠子宫内膜厚度与模型组相比有统计学差异,具有可比性,正常组及中药组大鼠子宫内膜厚度较模型组高(P<0.05),正常组与中药组之间无统计学差异(P>0.05);动情间期正常组及中药组大鼠子宫内膜厚度与模型组相比有统计学差异,具有可比性,正常组及中药组大鼠子宫内膜厚度较模型组高(P<0.05),正常组与中药组之间无统计学差异(P>0.05);动情前期及动情期中药组大鼠子宫内膜厚度与正常组及模型组相比有统计学差异,具有可比性,中药组大鼠子宫内膜厚度较正常组及模型组明显高(P<0.05),模型组大鼠子宫内膜厚度较其他两组明显低(P<0.05)。2.免疫组化法检测未孕大鼠子宫内膜MVD、整合素β3、LIF、STAT3、p-STAT3的表达正常组大鼠子宫内膜MVD、整合素β3、LIF、STAT3、p-STAT3表达与模型组相比,有统计学差异,具有可比性,正常组大鼠子宫内膜MVD、整合素β3、LIF、STAT3、p-STAT3表达高于模型组(P<0.05);中药组大鼠子宫内膜上述指标表达与模型组相比,有统计学差异,具有可比性,中药组大鼠子宫内膜上述指标表达较模型组高(P<0.05)。3.免疫组化法检测受孕大鼠子宫内膜MVD、整合素β3、LIF、STAT3、p-STAT3的表达正常组大鼠子宫内膜MVD、整合素β3、LIF、STAT3、p-STAT3表达与模型组相比,有统计学差异,具有可比性,正常组大鼠子宫内膜MVD、整合素β3、LIF、STAT3、p-STAT3表达高于模型组(P<0.05);中药组大鼠子宫内膜上述指标与模型组相比,有统计学差异,具有可比性,中药组大鼠子宫内膜上述指标表达高于模型组(P<0.05)。4.卵泡成熟日子宫内膜厚度中药组卵泡成熟日子宫内膜厚度与对照组相比,有统计学差异,具有可比性,中药组卵泡成熟日子宫内膜厚度高于对照组(P<0.05)。5.卵泡成熟日子宫内膜类型中药组A型子宫内膜所占比率与对照组相比,有统计学差异,具有可比性,中药组A型子宫内膜所占比率(60%)高于对照组(37%)(P<0.05);中药组B型子宫内膜所占比率与对照组相比,有统计学差异,具有可比性,中药组B型子宫内膜所占比率(37%)低于对照组(47%),(P<0.05);中药组C型子宫内膜所占比率与对照组相比,有统计学差异,具有可比性,中药组C型子宫内膜所占比率(3%)低于对照组(16%)(P<0.05)。6.妊娠率比较中药组妊娠率与对照组相比,有统计学差异,具有可比性,中药组妊娠率(40%)高于对照组(13%)(P<0.05)。结论:1.补肾活血中药可能通过调节LIF/STAT3信号通路相关因子的表达,调节血管生成,增加子宫内膜血供,改善子宫微环境,从而有利于提高子宫内膜的容受功能。2.补肾活血中药可能通过调节LIF/STAT3信号通路相关因子的表达,调节血管生成从而改善子宫微环境,提高子宫内膜的容受功能,有利于妊娠的维持。3.补肾活血法可增加PCOS不孕症患者促排卵周期中的子宫内膜厚度,改善子宫内膜类型,提高妊娠率。
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