发酵蚕蛹替代鱼粉饲喂大口黑鲈研究

来源 :江苏科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhrmghgws001
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缫丝副产物蚕蛹是来源充足且价格低廉的优质蛋白源,然而其加工利用率偏低,利用不当会造成资源的巨大浪费及环境污染。大口黑鲈是我国重要的经济养殖鱼类,因肉食性特点其对饲料蛋白需求量较高,饲料中鱼粉比重大,然而随着鱼粉资源的短缺以及价格的不断攀升,大口黑鲈养殖成本上升。由此,本文以大口黑鲈为研究对象,分析饲料中发酵蚕蛹替代鱼粉对其生长性能、饲料利用和鱼体组成的影响,并从分子水平及肠道微生物角度探究相关影响机制,以期为大口黑鲈开发鱼粉替代蛋白源和降低水产饲料成本提供参考资料,从而推进蚕蛹资源的开发利用。主要研究结果如下:(1)用发酵蚕蛹粉替代鱼粉制备大口黑鲈专用饲料。根据大口黑鲈基础饲料及其营养需求,逆向优化缫丝蚕蛹营养品质,探究发酵蚕蛹作为鱼粉替代蛋白源的潜力,并对制备饲料进行营养价值综合评价。结果表明:将饲料中鱼粉用蚕蛹粉直接替代,饲料粗蛋白含量未达标,粗脂肪含量偏高,易造成鱼体脂肪沉积,故不能满足大口黑鲈营养需求,因此需对蚕蛹进行加工处理。采用白色假丝酵母菌(BNCC 336485)对蚕蛹进行发酵(接种量2%),蚕蛹粗蛋白含量提高13.93%(p<0.05),粗灰分减少83.32%(p<0.05),氨基酸总量提高2.55%,蛋白溶解度提高6.01倍(p<0.05),肽得率提高13.41倍(p<0.05),分子量在15 k Da以上的大分子蛋白被有效降解,蛋白水解物DPPH自由基清除活性、超氧自由基的清除活性及还原力分别提高12.54%、93.38%和51.28%。此外,较酶解处理,发酵能够有效改善蚕蛹感官异味。因此,发酵蚕蛹粉营养得到优化,蛋白可利用性提高,生物活性增强,且固有异味得到改善,其替代鱼粉制备专用饲料的粗蛋白含量为45.97%、总能为l6.91±0.02 kcal/kg,完全满足大口黑鲈营养需求。综上,用发酵蚕蛹粉替代鱼粉可以制备大口黑鲈专用饲料。(2)发酵蚕蛹粉替代鱼粉的专用饲料饲喂大口黑鲈的效果评价。用发酵蚕蛹粉以不同水平替代鱼粉制备专用饲料,考察其对大口黑鲈生长、饲料利用及鱼体组成的影响,并对替代方案进行经济性分析。结果表明:饲喂大口黑鲈70 d,实验组成活率均为100%,其中30%发酵蚕蛹替代组(G3组)特定生长率提高8.6%,饲料利用效率提高26.22%(p<0.05),且脏体比降低22.20%(p<0.05),表明能够促进大口黑鲈生长,并增强其可食性;鱼体肌肉粗蛋白含量增加16.66%(p<0.01),粗脂肪含量减少82.86%(p<0.01),鲜味氨基酸含量提高1.05倍,呈味氨基酸含量提高1.06倍,表明对鱼体组成具有积极影响,确定饲料中发酵蚕蛹粉的鱼粉替代比例为30%,可使成本减少约1/4。综上,30%发酵蚕蛹替代饲料中鱼粉,能够对大口黑鲈的生长、饲料利用及鱼体组成起积极影响,且该替代方案具有良好的技术经济性。(3)从分子水平研究发酵蚕蛹替代鱼粉对大口黑鲈生长和健康的影响机制。采用实时荧光定量PCR检测了大口黑鲈脂代谢相关基因(CPT-1、LPL和HL)、激素调节相关基因(GH、IGF-1和LEP-A),以及免疫相关基因(TLRs和ILs)在其全脑及肝脏组织中的表达情况。结果表明:与对照组相比,采用30%发酵蚕蛹粉替代鱼粉能显著上调脂代谢相关基因LPL和HL(p<0.01);显著上调生长激素基因GH(p<0.01)和瘦素基因LEP(p<0.01);显著上调免疫相关基因TLRs和ILs(p<0.01)。综上,在饲料中以30%发酵蚕蛹粉替代鱼粉,能够显著上调脂代谢(LPL和HL)、激素调节(GH和LEP-A)及免疫(TLRs和ILs)相关基因表达,共同促进大口黑鲈生长健康。(4)从肠道微生物入手探究发酵蚕蛹替代鱼粉对大口黑鲈生长和健康的影响机制。采用16S r DNA扩增子测序技术,分别将对照组及G3组大口黑鲈肠道细菌总DNA的V3-V4可变区扩增进行菌群结构分析。结果表明:以30%发酵蚕蛹替代鱼粉,没有改变大口黑鲈肠道微生物优势菌门类,但变形菌门物种丰度降低了68.14%、厚壁菌门/拟杆菌门比值降低了1.24倍,放线菌门的物种丰度提高了83.81%;3个菌种的物种丰度出现显著上调(p<0.05),2个显著下调(p<0.05),绝大多数不存在显著差异(p>0.05);微生物种类增加1.31倍,微生物群落多样性显著提高(p<0.05),特有功能得到丰富。综上,在饲料中以30%发酵蚕蛹粉替代鱼粉,可改变大口黑鲈肠道微生物优势菌门类物种的丰度及物种多样性,从而调控大口黑鲈对饲料营养物质的吸收利用。综上,发酵蚕蛹替代鱼粉制备等氮等能饲料饲喂大口黑鲈可行,饲喂效果评价确定发酵蚕蛹粉最佳替代水平为30%,结合大口黑鲈生长代谢相关基因表达及肠道菌群结构分析探究发酵蚕蛹粉饲料对大口黑鲈的作用机制,为开发饲料中鱼粉替代蛋白以及降低水产养殖成本提供了关键技术,从而推进蚕蛹资源化利用。
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