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土茯苓[Smilax glabra Robx.]为百合科（Liliaceae）植物光叶菝葜的干燥根状茎,古籍记载结合现代药理研究表明,土茯苓具有解重金属毒的作用。文献报道及课题组前期研究显示,土茯苓总提取物能解重金属Pb毒性。然而,其解毒活性成分不清,药效物质基础不明。据以上现状,本论文开展土茯苓解重金属Pb毒性的物质基础研究,共包括四个内容:1)土茯苓乙酸乙酯部位解Pb毒性研究;2)乙酸乙酯部位化学成分研究;3)乙酸乙酯部位总黄酮纯化工艺研究及定性定量分析;4)土茯苓总黄酮解Pb毒性研究。具体如下:（1）土茯苓土茯苓乙酸乙酯部位解Pb毒性研究通过建立急性铅中毒模型,根据铅含量、生化指标及组织形态学检测结果,筛选土茯苓解Pb毒的活性部位。铅含量结果显示,与模型组相比,总提取物组与乙酸乙酯组小鼠血液、肝、肾脏铅含量显著降低,乙酸乙酯组各部位铅含量分别为103.719±23.643μg/L、3.426±0.510μg/g、12.429±0.606μg/g;生化指标结果显示,与模型组相比,给药组血清MDA含量有所降低,GSH-Px、SOD含量均有不同程度提高,乙酸乙酯组MDA、GSH-Px、SOD含量分别为1.851±0.120nmol/m L、238.335±37.935U/m L、185.271±1.275U/m L,效果显著;病理切片结果显示,与模型组相比,各给药组小鼠肝、肾损伤程度均有改善。上述实验结果,提示土茯苓中有效成分具有解Pb毒的作用,且多集中在乙酸乙酯部位,为解重金属Pb毒的活性部位。（2）乙酸乙酯部位化学成分研究采用柱色谱技术对土茯苓乙酸乙酯部位进行分离纯化,共分离并鉴定出41个化合物,其中16个黄酮类化合物,11个苯丙素类成分,8个有机酸类成分,1个倍半萜类,2个二苯乙烯类,3个其他类成分,分别为:土茯苓苷A（1）、土茯苓酮A（2）、二氢槲皮素-7-O-α-L鼠李糖苷（3）、黄杞苷（4）、3’,4’,6-三甲氧基二氢黄酮（5）、二氢山柰酚（6）、花旗松素（7）、落新妇苷（8）、新落新妇苷（9）、新异落新妇苷（10）、异落新妇苷（11）、圣草酚-7-O-鼠李糖苷（12）、柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷（13）、柚皮素（14）、槲皮素-7-O-α-L鼠李糖苷（15）、槲皮素（16）、山奈酚3-O-[4’’’’’-O-乙酰基-α-L-鼠李糖基-（1→6）]-[β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（17）、3-（4-羟基-3,5-二甲氧基苯基）丙烷（18）、2-（3’,4’-二羟基苯基）-1,3-苯并二氧戊环-5-甲醛（19）、淫羊藿醇A2（20）、（+）-lyoniresinol（21）、Kompasinol A（22）、（+）-丁香脂素（23）、5-O-咖啡酰莽草酸（24）、5-O-咖啡酰莽草酸甲酯（25）、阿魏酸（26）、丁香酸（27）、原儿茶酸（28）、对羟基苯甲酸（29）、莽草酸乙酯（30）、莽草酸甲酯（31）、莽草酸（32）、4’-dihydrophaseic acid（33）、flufuran（34）、顺式白藜芦醇（35）、反式白藜芦醇（36）、3,5,7-三羟基色原酮（37）、土茯苓苷（38）、5-羟基麦芽酚（39）、3,4,5-三甲氧基苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（40）、5-羟甲基糠醛（41）。其中2个新化合物,16个化合物为首次从该属中分离得到,2个从该植物中分离得到。（3）乙酸乙酯部位总黄酮纯化工艺研究及定性定量分析选用落新妇苷作为对照品建立总黄酮含量测定方法,得到土茯苓乙酸乙酯部位总黄酮最佳纯化工艺为选用ODS填料,25%甲醇水溶液为上样溶剂冲洗3倍柱体积,60%甲醇水溶液为洗脱溶剂洗脱3倍柱体积,总黄酮含量提高16.0%,落新妇苷含量相应提高7.1%。采用薄层色谱鉴别,以甲苯:乙酸乙酯:甲酸（20:32:9）为展开剂,预饱和10 min后展开,取出晾干,再以10%硫酸乙醇溶液显色。结果显示在同一薄层板上落新妇苷对照品与乙酸乙酯供试品溶液在相同位置上,显示相同的斑点。主成分HPLC特征图谱分析,根据混合对照品和样品的特征图谱对比分析结果显示,相同条件下,土茯苓乙酸乙酯部位中主要有6个特征共有峰,分别是新落新妇苷,落新妇苷,花旗松素,新异落新妇苷,异落新妇苷,黄杞苷。采用高效液相色谱仪,以乙腈-0.1%甲酸水（18:82）,流速:1m L/min,检测波长:290 nm为色谱条件,建立方法并考察,根据标准曲线计算土茯苓中落新妇苷含量为35.8%。（4）土茯苓总黄酮解Pb毒性研究通过建立慢性铅中毒模型,根据铅含量、生化指标及组织形态学检测结果,考察土茯苓总黄酮解Pb毒性。铅含量结果显示,模型组小鼠血铅含量超过200μg/L,同时肝、肾脏铅含量也显著升高。给药组小鼠血液、肝、肾脏铅含量与模型组相比均显著降低,且存在剂量依赖关系,高浓度组小鼠各部位铅含量分别为112.725±9.614μg/L、0.111±0.006μg/g、0.731±0.231μg/g;生化指标结果显示,与模型组相比,给药组小鼠ALT、AST、Cr、BUN水平均有不同程度的降低,且总黄酮高浓度组效果最好,含量分别为21.528±3.812U/L、40.227±1.633U/L、11.560±0.570μmol/L、7.207±0.625mmol/L;组织形态学结果显示,与模型组相比,各给药组小鼠肝、肾损伤程度均有所改善,其中总黄酮H组修复作用优于L、M组,组织结构接近正常。综上,表明土茯苓总黄酮类成分具有良好的排铅作用,对铅诱导的肝、肾功能损伤具有一定的保护作用,且存在剂量依赖关系,为土茯苓解重金属Pb毒的活性成分群。