苍柏祛痛胶囊的制剂工艺、质量标准和初步药效学研究

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目的:确立苍柏祛痛胶囊的制剂工艺和质量标准,并做初步药效学研究,探讨苍柏祛痛胶囊镇痛抗炎作用机制,为中试生产和临床用药提供实验室依据。方法:(1)苍柏祛痛胶囊制剂工艺研究:采用单因素考察和正交试验设计的方法,确立除黄花菜药味的最佳水提工艺,进行验证实验;测定混合浸膏粉流体学相关数据,确立该制剂成型工艺。(2)苍柏祛痛胶囊质量标准研究:测定苍柏祛痛胶囊的盐酸小檗碱的含量,确立该制剂的质量标准。(3)苍柏祛痛胶囊抗炎镇痛效果研究:将50只清洁级昆明小鼠随机分为5组,每组10只:空白组、苍柏祛痛胶囊高、中、低组(16.4g/kg、8.24g/kg和4.12g/kg)和痛风定胶囊组(9.86g/kg)。预饲7d后,采用热板法、扭体法、步态评级试验和耳廓肿胀试验,分别观察测定小鼠痛阈提高百分率、扭体次数、步态评分和耳廓肿胀抑制率。(4)对小鼠高尿酸血症模型治疗作用的研究:将清洁级小鼠60只,随机分为6组,每组10只:空白组、模型组、阳性药组、苍柏祛痛胶囊低、中、高剂量组。经2.5%氧嗪酸钾溶液1ml/100g腹腔注射15d后,眼眶采血后,处死。采用比色法测定各组小鼠血清尿酸(SUA)水平和肝、肾脏组织黄嘌呤氧化酶(XOD)活性;采用苏木素-伊红染色法(HE)检测肝、肾脏组织病理形态变化。结果:(1)苍柏祛痛胶囊水提工艺研究:对于盐酸小檗碱含量影响程度次序为:加水量>提取次数>提取时间,提取时间对盐酸小檗碱的含量没有显著差异,P>0.05,加水量和提取次数有显著差异,P<0.05。分析可知,最佳水提工艺为A2B3C3(A为加水量,B为提取时间,C为提取次数),即加水量为20倍,蒸馏时间为1.5h,提取次数为3次。(2)建立了苍柏祛痛胶囊的质量标准,采用测定盐酸小檗碱,对制剂进行质量控制。(3)苍柏祛痛胶囊抗炎镇痛试验研究:与空白组比较,苍柏祛痛胶囊低、中、高剂量组均能使得小鼠痛阈提升(P<0.01),中剂量组在60min时效果最为明显;与空白组比较,苍柏祛痛胶囊低、中两个剂量组明显减少小鼠扭体次数,存在显著性差异(P<0.05);苍柏祛痛胶囊低、中、高剂量组在15min时,对小鼠步态改善效果最好;高剂量组在30min时作用明显;苍柏祛痛胶囊各剂量组均可有效抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀,抑制率分别为47.28%、50.73%和41.32%,其中以中剂量组抑制效果最佳。(4)对小鼠高尿酸血症的影响:与空白组比较,模型组肝肾组织中XOD含量和SUA明显上升(P<0.05),表明造模成功。与模型组比较,给药各组SUA均明显下降(P<0.01);苍柏祛痛胶囊中、高剂量组肝脏XOD均明显上升(P<0.01);与模型组比较,苍柏祛痛胶囊中剂量组能够显著减轻小鼠肝肾组织水肿、肿胀和炎性细胞浸润等病理变化。结论:(1)试验所得苍柏祛痛胶囊的制剂工艺能够有效保证盐酸小檗碱含量标准,为该药中试生产奠定实验室依据。(2)采用盐酸小檗碱测定法作为该制剂质控标准,能够保证该制剂的有效性、安全性,且该质控标准稳定性、重复性好。(3)苍柏祛痛胶囊能够显著提高小鼠痛阈值,减少小鼠扭体次数,缓解改善小鼠步态;同时能够抑制炎症发生和发展。(4)苍柏祛痛胶囊能够显著降低高尿酸血症小鼠SUA水平;显著提高肝脏组织中XOD含量;并对肝肾脏具有一定保护作用。
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