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目的应用MTT法检测新型钛钽生物梯度复合材料经过培养基浸提后配制成不同浓度浸提液对小鼠L929细胞的细胞毒性影响、应用流式细胞仪检测新型复合材料对L929细胞的细胞周期以及细胞凋亡的影响,评价新型复合材料的生物安全性,为其日后投入到临床应用提供实验依据。方法本实验研究分为三部分:1由华北理工大学材料学院采取水热-等离子喷涂钽涂层梯度处理的方法制备新型钛钽生物梯度复合材料,采用MTT法检测新型复合材料对L929细胞毒性的影响。实验分为五组:纯钛组(A组)、水热处理组(B组)、钽涂层组(C组),将含有10%胎牛血清的完全培养基作为阴性对照组(D组),含0.64%苯酚的完全培养基为阳性对照组(E组)。采用MTT法测定细胞经各实验组浸提液培养1d,3d,5d后的吸光度值(OD值),计算各组的细胞相对增值率(RGR),并评定各组的毒性分级。2新型钛钽生物梯度复合材料对L929细胞周期的影响。实验分为四组:纯钛组、水热处理组、钽涂层组以及阴性对照组。细胞经各组浸提液培养48h后PI染色,上流式细胞仪对不同材料浸提液干预后的细胞进行细胞周期检测,观察其变化。3新型钛钽生物梯度复合材料对L929细胞凋亡的影响。实验分为四组:纯钛组、水热处理组、钽涂层组以及阴性对照组。细胞经各组浸提液培养48h后采用Annexin V/PI染色法染色,上流式细胞仪观测各组细胞凋亡的情况。结果1新型钛钽生物梯度复合材料经扫描电镜观察结构均匀且致密,表面有粗糙的纹理,无明显裂痕,表面多孔结构内有熔融成圆球形的钽颗粒。2 MTT法检测细胞毒性结果:100%钽涂层组每个时间段吸光度值均比阴性对照组高,有统计学差异(P<0.05);阴性对照组及实验组的吸光度值随着培养时间的延长而升高,差异有统计学意义(P<0.05),而阳性对照组三个时间段吸光度值无明显差异(P>0.05);同一时间段内,阳性对照组与实验组相比吸光度值有较大差异,差异有统计学意义(P<0.05)。3 PI法检测细胞周期结果:G1期:钽涂层组与其他两个实验组相比有统计差异学(P<0.05),与阴性对照组相比无统计学差异(P>0.05);S期:纯钛组和水热处理组与阴性对照组相比有统计学差异(P<0.05),钽涂层组与阴性对照组相比无统计学差异(P>0.05);G2期:纯钛组与阴性对照组相比无统计学差异(P>0.05),水热处理组和钽涂层组与阴性对照组相比有统计学差异(P<0.05)。4 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡结果:各实验组与阴性对照组相比有统计学差异(P<0.05);水热处理组和钽涂层组与纯钛组相比有统计学差异(P<0.05)。结论1新型钛钽生物梯度复合材料在体外细胞毒性试验中无短期细胞毒性,并且与纯钛材料相比有一定程度促进细胞增殖作用。2新型复合材料与纯钛材料相比,对L929细胞周期产生了一定的促进作用。3新型复合材料与纯钛材料相比,对L929细胞凋亡的影响更小。图20幅;表11个;参84篇。