论文部分内容阅读
目的本实验研究人β-防御素-2(human beta-defensin-2,HBD-2)在唾液腺良恶性肿瘤和炎症组织中的表达特征及其与临床病理学参数之间的关系,并培养ACC-M涎腺肿瘤细胞,观察检测HBD-2的表达特征,研究可能对其产生调控的基因,初步探讨其在唾液腺肿瘤细胞生物学中的作用及机制。方法RT-qPCR、免疫组化方法检测HBD-2 mRNA和蛋白在唾液腺良恶性肿瘤组织、炎症组织和正常唾液腺组织中的表达,分析免疫组化结果与唾液腺恶性肿瘤临床病理学参数的关系。前期试验结果显示mPGES-1可能与HBD-2的表达有关,由于PGE2分泌与mPGES-1正相关,所以我们选择研究PGE2是否为HBD-2的调控基因。通过培养人涎腺癌细胞ACC-M,用不同浓度的PGE2分别处理细胞后RT-qPCR方法检测HBD-2表达,了解PGE2分泌与HBD-2表达的关系。结果RT-qPCR结果显示,与唾液腺正常组织比较,良性肿瘤组HBD-2 mRNA表达量为其6.468倍,显著高于涎腺正常组织组(p<0.05);恶性肿瘤组为0.334倍,显著低于涎腺正常组织组(p<0.05);唾液腺炎症组为10.563倍,显著高于唾液腺正常组织组(p<0.05)。良性肿瘤组mPGES-1 mRNA表达量为正常组织的0.896倍,差异无显著性(p >0.05);恶性肿瘤组为8.326倍,显著高于涎腺正常组织组(p<0.05);涎腺炎症组为11.581倍,显著高于涎腺正常组织组(p<0.05)。免疫组化结果显示,在唾液腺癌患者中,HBD-2表达与淋巴转移和TMN分期相关,与患者肿瘤大小、分化程度、年龄、性别等无关。用不同浓度PGE2处理肿瘤细胞,10 nmol/ml组HBD-2表达量为对照组的1.142倍,差异无显著性(P>0.05);50 nmol/ml组HBD-2表达量为对照组的2.364倍(P<0.05);100nmol/ml组HBD-2表达量为对照组的11.917倍(P<0.05);200 nmol/ml组HBD-2表达量为对照组的13.114倍(P<0.05);1μmol/ml组HBD-2表达量为对照组的0.453倍(P<0.05)。结论良性肿瘤组中HBD-2高表达,mPGES-1表达无明显差异;恶性肿瘤组中HBD-2低表达,mPGES-1高表达;炎症组中HBD-2和mPGES-1均为高表达。HBD-2的表达与淋巴转移和TMN分期相关,与患者肿瘤大小、分化程度、年龄、性别等临床病理因素无关。较低浓度(50-200nmol/ml)PGE2能上调HBD-2mRNA表达,高浓度(1μmol/ml)PGE2抑制HBD-2mRNA表达。