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目的：N-甲基-D-天门冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate Receptor, NMDAR, NR）与兴奋性突触传递、突触可塑性、学习和记忆等许多中枢活动密切相关,其过度激活所介导的兴奋毒性与机体应激、药物成瘾性、疼痛、脑组织继发损伤等有密切关系。通过选择性干预NR活动,可能为相关疾病提供有效的治疗手段。已有的NR拮抗剂或阻断剂均为人工合成的小分子药物,容易弥散通过血脑屏障,但作用选择性低,常引起意识模糊、焦虑不安、幻觉等严重毒副作用,且存在难以超早期用药的问题,难以进入临床。NR1是NR的功能亚单位,预测NR1抗原表位,制备NR1口服疫苗是超早期干预机体应激、脑损伤、药物成瘾、疼痛等的可行方法之一。转铁蛋白受体（Transferrin receptor,TfR）抗体可能可以携带NR1抗原通过血脑屏障,从而使得NR1抗原能够更好的在中枢神经系统发挥作用。因此,本研究旨在用噬菌体展示技术预测小鼠NR1抗原表位,选择小鼠TfR构建NR1-TfR融合蛋白真核表达载体,为NR1口服疫苗的制备做好前期准备。方法：①用小鼠NR1单克隆抗体（Monclone antibody, mAb）免疫亲和筛选以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ上的随机十二肽,经过三轮的生物筛淘后,从第三轮洗脱物中挑取所有56个噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA并测序。②从Genebank查到小鼠TfR编码序列（Coding sequence,CDS）,编号为GenBank NP035768,将此序列和筛选所得NR1抗原表位优势序列,通过设计引物、聚合酶链反应（Polymerase chain reaction, PCR）合成融合表达基因序列（将该基因片段命名为NR1-TfR）并连接到质粒载体pUC57（将该质粒命名为pUC57-NRl-TfR）。③通过限制性内切酶KpnI和XbaI双酶切质粒pUC57-NR1-TfR获得NR1-TfR片段,并连接到真核表达载体pcDNA3.1中,然后用氯化钙法转化到大肠杆菌DH5α,氨苄青霉素抗性筛选获得阳性克隆,扩增后提取质粒,进行KpnI和XbaI双酶切后电泳,并进行生物测序鉴定。结果：经过3轮筛选后能与NR1单克隆抗体特异性结合的噬菌体得到了有效富集,DNA测序结果表明56个单克隆噬菌体中有54个表达为同一个氨基酸序列：DDWVISTQSLKS,其余两个单克隆噬菌体表达的氨基酸序列分别为：HSSHTSNTLPSV和TNTPPSQRVHLS。酶切、电泳证实NR1-TfR片段被成功的克隆到质粒载体pcDNA3.1中,测序结果证明重组质粒载体插入序列与设计的靶基因片段完全一致。结论：从噬菌体展示的随机十二肽库中成功筛选到了能与NR1特异性抗体结合的短肽DDWVISTQSLKS,该肽是NR1单克隆抗体结合的优势序列,可能模拟了天然抗原的某个表位。成功构建该优势序列与小鼠TfR真核表达质粒pcDNA3.1-NR1-TfR,为NR1口服疫苗的制备及其后续实验奠定了基础。