论文部分内容阅读
目的：卵巢恶性肿瘤严重威胁女性的健康，现已成为死亡率位于第三位的妇科恶性肿瘤。目前的治疗方法还是以手术和辅助化疗为主,但患者生存率未见明显改善。研究发现人参皂苷-Rh2（Ginsenoside-Rh2，G-Rh2）对多种肿瘤细胞均有抑制细胞增殖、诱导凋亡的作用。但其在卵巢癌中的作用及其机制研究尚不清楚。本论文对G-Rh2在卵巢癌CAOV3细胞中的作用进行了研究，并对其作用机制进行了初步的探索。 方法：1.应用MTT方法检测G-Rh2对卵巢癌CAOV3细胞是否具有毒性，并测定其IC50值；2.荧光染色法进行细胞形态学观察；3.采用流式细胞仪分析验证是否存在细胞凋亡；4.应用Weston blot方法检测Caspase-3特异性底物PARP的断裂情况；5.体外分析凋亡细胞关键酶Caspase-3，-9的活性。 结果：1.G-Rh2对卵巢癌CAOV3细胞有抑制增殖的作用，且呈明显的剂量效应关系，其IC50值为3.12ug/mL；2.在荧光显微镜下观察到在G-Rh2诱导的卵巢癌CAOV3细胞中出现了细胞变圆、膜发泡、细胞核固缩断裂等细胞凋亡特有形态学变化；3.经过流式细胞仪（Annexin-V-PI复染法）分析检测发现，G-Rh2作用24h后，CAOV3细胞早期凋亡和晚期凋亡的百分率分别为36.60％和26.47%，较对照组的1.59%和0.03%明显增多；4.免疫印迹法检测发现，药物作用12h开始，Caspase-3特异性底物PARP发生明显断裂；5.Caspase活性检测方法检测到Caspase-3,-9被激活。 结论：人参皂苷-Rh2对人卵巢癌 CAOV3细胞的细胞毒性作用是通过诱导Caspase-9和Caspase-3参与的细胞凋亡来实现的。