IFN-γ和LIGHT配比转染对HepG2细胞凋亡和Caspase-3、Sunrvivin表达影响的实验研究

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目的观察经脂质体介导LIGHT、IFN-γ基因转染人肝癌细胞HepG2后的细胞凋亡和Caspase-3、Survivin的表达的变化。方法用本实验室已成功制备的LIGHT、IFN-γ真核细胞表达质粒pcDNA4C-LIGHT-cDNA、pcDNA4/HisMax-hIFN-γ及其转化的E.coli JM-109感受态大肠杆菌,经质粒提取后,以脂质体为中介转染培养的人肝癌细胞HepG2,同时设立对照组(未转染组)。分别于转染后12h,24h,48h收集HepG2细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡和凋亡因子Caspase-3、Survivin的表达。结果各时间段细胞凋亡率和Caspase-3表达量在对照组、LIGHT单转组、联合转染组呈逐渐递增趋势,Survivin的表达量呈逐渐递减趋势。结论LIGHT转染HepG2细胞后能通过调节caspase-3及survivin的表达来发挥促凋亡作用,IFN-γ能增强LIGHT诱导的HepG2细胞凋亡,且显著上调caspase-3的表达。
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