本论文对重金属铅的酶联免疫检测方法进行了系统的研究。采用双功能螫合剂ITCBE将重金属铅离子与钥孔嘁血蓝蛋白(KLH)连接制得免疫原免疫兔子,免疫亲和柱纯化血清得到高效价和高特异性的重金属铅多克隆抗体。采用双功能螫合剂ITCBE将重金属铅离子与牛血清蛋白(BSA)连接制得包被原,建立了一种间接竞争酶联免疫检测方法,对影响实验的各种因素(包被量、离子强度、pH值等)进行了优化与研究,包被量0.1μg/well,离子强度为1mmol/L的PBS, pH为7.5时所获得的标准曲线灵敏度最高,稳定性最好。本实验所建立方法的灵敏度(IC50)为3.48μg/L,检测限(IC15)为0.32μg/L。与其他金属离子的交叉反应率较低。对自来水、海河水、中药白芷、胡萝卜、虾蛄中的重金属残留进行了检测。自来水直接与螯合剂ITCBE螯合后PBS稀释5倍,海河水过0.22μm的水膜后再与螯合剂ITCBE螯合,PBS稀释8倍,中药白芷、胡萝卜、虾蛄则都将其烘干粉碎后采用强酸(浓硝酸10mL,高氯酸2mL)浸泡并用高压消解罐(160℃-180℃)硝化至溶液澄清,用Tris-HCl调节pH至中性,过0.22μm的水膜,用双蒸水稀释60倍,即可用于待测分析。添加3个不同浓度的重金属铅离子,回收率可达到78.5-121%。本实验所建立的方法在自来水中的检出限为1.6μg/L,在海河水中的检出限为2.56μg/L,在其他样品中的检测限为19.2μg/kg。板内变异和板间变异均小于16%。以上结果证明所建立的方法具有很高的准确性和精密度,能满足实际样品检测的要求。