基于纳米材料的新型疾病标志物荧光生物传感器研究

来源 :福州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yu_threestone
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发展新型疾病标志物的分析检测方法,对临床疾病的早期诊断有重要意义。近年来,随着分子生物技术的发展,将生物传感技术应用于疾病标志物的检测,开发一些操作简单、使用方便、可用于疾病临床诊断的传感分析技术成为了研究的热点。尤其是纳米材料的引入更进一步促进了生物传感器性能提升。本论文中合成了 一些生物相容性好的新型纳米材料,并用于构建检测疾病标志物的荧光传感平台。本文共分为四章:第一章为绪论,首先对疾病标志物做了相关的概述,包括疾病标志物的概念与特征、分类以及疾病标志物的临床检测方法;其次是对疾病标志物的传感器构建策略和发展历程进行概述;最后阐述了纳米材料在疾病标志物传感器中的应用。同时引出本论文的研究意义和内容。第二章开展了基于MnO2纳米片和发夹结构免酶催化自组装荧光传感器检测miRNA-21的研究。miRNA-21是近年来发现的乳腺癌标志物。在本章的实验中我们发现,MnO2纳米片能有效地猝灭标记在发夹DNA上荧光素的荧光,当存在miRNA-21时,miRNA-21能和发夹DNA结合,引发发夹结构无酶催化自组装反应(CHA),发夹DNA上荧光素荧光恢复,通过荧光恢复的强度来定量检测miRNA-21。实验结果表明,该方法在1 nM-50 nM之间有良好的线性关系,检测限可达到0.33 nM。第三章是羟基氧化钴纳米片猝灭香豆素荧光机理及其应用研究。碱性磷酸酶(ALP)是原发性肝癌、骨细胞癌、阻塞性黄疽、佝偻病等疾病的标志物。在本章中,通过对羟基氧化钴纳米片猝灭香豆素荧光的机理进行研究,发现羟基氧化钻纳米片通过内滤效应和静态猝灭效应共同猝灭香豆素荧光。在ALP存在下,能催化水解L-抗坏血酸二磷酸盐(AAP)产生抗坏血酸,抗坏血酸还原羟基氧化钴,消耗羟基氧化钴纳米片,香豆素荧光恢复。实验结果表明,荧光强度与ALP浓度在0.5 U/L~51.8 U/L之间呈良好线性关系,检测限0.21 U/L。第四章是基于聚多巴胺纳米微球检测T4多核酸激酶及抑制剂。在本章中,采用生物相容性好的聚多巴胺纳米微球作为荧光淬灭剂,当体系中有T4多核酸激酶时,双链DNA在其作用下磷酸化,λ外切酶剪切得到单链DNA,单链DNA吸附在聚多巴胺微球上,标记在DNA上的荧光素的荧光被猝灭。实验结果表明,该方法在0.05 U/mL~10 U/mL之间呈良好线性关系,检测限为0.018 U/mL。
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