肺炎链球菌、铜绿假单胞菌诱发大鼠肺炎后WBC、CRP、PCT表达的实验研究

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:winterryliang
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目的:  选取社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)和医院获得性肺炎(hospital acquired pneumonia,HAP)常见的致病菌:肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,SP)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginos,PA)分别作为革兰阳性菌(gram-positive bacterium,G+)与革兰阴性菌(gram-negative bacterium,G-)的代表,通过建立大鼠肺炎链球菌、铜绿假单胞菌肺炎模型,观察白细胞计数(white blood count,WBC)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血清降钙素原(Procalcitionin,PCT)水平在PA和SP肺部感染大鼠血清中的动态变化规律,探讨WBC、CRP、PCT在区分肺部G+与G-感染中的价值,为临床抗生素的使用提供实验依据.  方法:  清洁级,雄性,SD大鼠60只,200~260g,根据随机法分为SP组、PA组和正常对照组,SP组和PA组采用经口气管插管法分别注入SP、PA混悬液,正常对照组用同等方法注入等体积灭菌生理盐水.分别于实验前即0h,实验后6h、12h、18h、24h采血检测WBC、CRP、PCT,采用动物血液细胞分析仪测定WBC,双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清CRP、PCT浓度,收集并用统计学软件分析处理数据,比较实验前后及不同组间大鼠血液WBC、CRP、PCT表达水平的变化规律.所有大鼠于实验24h采血后,无菌状态下剖胸取左肺组织,HE染色观察病理改变,取右肺下叶组织做细菌学检查.  结果:  1.一般情况:实验后,PA组和SP组大鼠呼吸急促,双侧胸廓呼吸幅度增强,蜷缩于鼠笼角落,活动减少,对周围刺激反应迟钝,精神状态较差,毛色粗糙无光泽,可见竖毛现象,饮食、饮水量均较前有所下降,正常对照组大鼠实验前后无显著变化.  2.体温:注菌前3天分别于早晨8点测量大鼠体温,注菌后每6h测量体温.实验前,所有动物体温波动在(37.6±0.5)℃之间,无明显差异(P>0.05).SP组、PA组和正常对照组于实验后6h时体温下降,SP组(34.8±0.3)℃,PA组(34.5±0.4)℃,正常对照组(35.6±0.5)℃,在随后的12h、18h、24h所有大鼠体温逐渐上升,恢复如前.24h时,SP组(36.8±0.4)℃,PA组(36.6±0.6)℃,正常对照组(37.8±0.6)℃,SP组和PA组比较,无统计学差异(P>0.05),SP组、PA组分别与正常对照组比较,可见统计学差异(P<0.05).  3.病理改变:肉眼观:正常对照组大鼠肺组织颜色红润、质地柔软.SP和PA组大鼠肺组织颜色明显变深,具有严重的组织充血、出血现象.镜下观:SP和PA组肺组织破坏明显,正常肺泡结构减少,腔内可见渗出物,肺泡间隔增厚,大量炎细胞浸润;正常对照组肺泡结构较为均匀,无炎细胞浸润.  4.细菌学检查:PA组和SP组大鼠肺组织匀浆经培养可见菌落生长,培养出的细菌由本院细菌室API细菌鉴定系统验证分别为PA标准菌株和SP标准菌株,菌落计数均>6.8×105cfu/g.正常对照组大鼠肺组织匀浆均未培养出细菌生长.  5.WBC、CRP、PCT浓度变化:实验前各组WBC、CRP、PCT浓度无明显差异(P>0.05).接种菌液后SP和PA组各时间点WBC、CRP、PCT浓度较正常对照组有明显升高(P<0.05),SP、PA组CRP水平在18h达高峰,24h降低;而PCT水平在12h达高峰,18h后降低.同时间点SP、PA组WBC、CRP浓度无组间差异(P>0.05),而PCT浓度存在组间差异,(P<0.05),且PA组PCT浓度高于SP组.  结论:  1.经口气管插管法可成功复制大鼠肺部细菌感染模型.  2.肺部细菌感染组WBC、CRP、PCT水平高于正常对照组,差异具有统计学意义,提示WBC、CRP、PCT对早期诊断细菌性肺炎具有重要意义.  3.本研究发现PA组的PCT浓度高于SP组,组间差异有统计学意义,推测血清PCT水平在一定程度上可以鉴别肺部G+与G-感染.然而,CRP浓度在PA组和SP组之间未见统计学差异,关于CRP在鉴别细菌性肺炎G+与G-感染中的价值,还需进一步研究探讨.
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