基于AFM的细胞力学特性实验研究

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细胞的力学特性关系着细胞的生长以及细胞自身的调节功能,细胞的变形和疾病之间是相关联的,这在细胞过滤和细胞压痕试验中得以验证。AFM的出现以及发展使通过机械方法鉴定单个细胞的特性成为一种可能,同时由于AFM具有精度高以及能在生物环境中测量操作等特点,因此在纳米生物学上得到广泛的应用。AFM不仅能够扫描微纳尺寸的图像,让人类肉眼看不见的东西通过触摸的方式看到,同时还能通过悬臂传递样品受力情况,实现生物样品力学特性的测量。本文利用AFM测量活细胞的弹性模量,并对测量活细胞在人体生物环境中细胞粘附力的实验方法做了部分探究,讨论了该种方法的实用性。建立可查询数据库用以查询分析细胞的机械特性。首先,本文针对AFM压痕实验选择相应的模型计算细胞弹性模量,并分析用AFM压痕的实验参数对活细胞弹性模量测量结果的影响。在对已有的压痕实验方法进行具体分析的基础上,设计单一变量法实验,提出压痕点数以及悬臂下降速度对测量活细胞弹性模量的影响,对用AFM测量活细胞弹性模量实验进一步改善。提高了测量结果的可靠性和准确性。其次,基于人体环境中细胞的粘附力是细胞与细胞以及细胞与基质之间的粘着能力的理论。使用AFM将活细胞粘到悬臂上,以细胞为探针,测量细胞与细胞之间的粘附力。设计单细胞力谱(SCFS)实验,并利用SCFS实验测量Hela细胞的粘附力特性,测量得到Hela细胞的粘附力为4.95±1.1nN。探究加载力和加载时间对细胞粘附力的影响规律,得到结论:在加载力不变,加载时间增长的情况下,细胞之间的粘附力增大。最后,测量肺部的正常细胞与癌细胞的弹性模量,分析细胞弹性模量和其癌变之间的关系,建立相对小型的数据库管理系统,方便查询和快速诊断。
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