【摘 要】
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多次超排是畜牧生产、胚胎工程学和体外胚胎生产的关键技术,但此技术会对动物卵巢和早期胚胎产生氧化应激,从而影响动物的繁殖机能。益母草碱（Leonurine,LEO）具有清除超氧化物的能力,可以调节活性氧和抗氧化防御系统之间的平衡,从而减轻氧化应激。本研究以小鼠为模型,通过分析LEO对多次超排小鼠早期胚胎发育潜能及其抗氧化能力的影响,并统计多次超排小鼠经LEO处理后的产仔情况,探讨了LEO对多次超排小
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多次超排是畜牧生产、胚胎工程学和体外胚胎生产的关键技术,但此技术会对动物卵巢和早期胚胎产生氧化应激,从而影响动物的繁殖机能。益母草碱（Leonurine,LEO）具有清除超氧化物的能力,可以调节活性氧和抗氧化防御系统之间的平衡,从而减轻氧化应激。本研究以小鼠为模型,通过分析LEO对多次超排小鼠早期胚胎发育潜能及其抗氧化能力的影响,并统计多次超排小鼠经LEO处理后的产仔情况,探讨了LEO对多次超排小鼠繁殖潜能的影响。1.探究了多次超排对小鼠卵巢功能和早期胚胎发育潜能的影响。通过观察一、三、四和五次超排（R1、R3、R4和R5）小鼠卵巢抗氧化能力,卵母细胞获卵数、受精率、受损率、早期胚胎分裂率和囊胚率情况,并比较各组小鼠早期胚胎ROS和GSH的差异,以探讨多次超排对小鼠早期胚胎发育潜能的影响,从而筛选出卵巢功能和早期胚胎发育潜能显著下降的多次超排组进行后续试验。结果显示,随着超排次数增加小鼠卵巢抗氧化能力下降,卵母细胞质量下降,早期胚胎ROS水平升高、发育潜能下降。其中,当超排次数达到3次（R3组）时,与一次超排（R1组）相比,R3组卵巢抗氧化能力显著下降（P＜0.05）,且胚胎囊胚发育率显著降低（29.39±3.97 vs 74.65±7.93,P＜0.05）,早期胚胎ROS水平却显著高于R1组（54.08±5.54 vs 17.59±2.86,P＜0.05）。因此,选择三次超排（R3）作为后续试验处理对象。2.探讨了LEO对多次超排小鼠繁殖潜能的影响。首先比较了小鼠在三次超排期间同时灌胃不同浓度（0、2、4、6、8和10 mg/（kg.d））LEO对卵母细胞质量及其早期胚胎发育潜能的影响,以筛选出LEO的最适给药量R3+LEO组;进而通过分析R1、R3和R3+LEO组小鼠卵巢抗氧化能力、早期胚胎内GSH含量、ROS水平、线粒体功能、胚胎发育率和囊胚总细胞数,以及母鼠繁殖性能和新生小鼠生长性能之间的差异,以探讨LEO对多次超排小鼠繁殖潜能的影响。结果显示,灌胃8 mg/（kg.d）LEO提高了三次超排小鼠卵巢抗氧化能力、卵母细胞质量和早期胚胎发育潜能。其中,R3+LEO组与R3组相比,胚胎囊胚发育率显著升高（63.82±5.65 vs 26.64±7.93,P＜0.05）,且早期胚胎内GSH含量（14.27±0.17 vs 11.30±0.31,P＜0.05）和JC-1极性（1.89±0.08 vs 1.13±0.18,P＜0.05）亦显著提高,而ROS水平显著降低（37.68±1.50 vs 54.08±5.34,P＜0.05）。此外,R3+LEO组母鼠繁殖性能和新生小鼠生长性能显著高于R3组（P＜0.05）。表明,LEO的最适给药量是8 mg/（kg.d）,多次超排期间灌胃适量的LEO能够提高多次超排小鼠的繁殖潜能。综上所述,多次超排会导致小鼠卵巢和早期胚胎产生氧化应激,影响小鼠的繁殖机能。多次超排期间同时灌胃8 mg/（kg.d）LEO能够提高小鼠卵巢抗氧化能力,改善卵母细胞质量,减少早期胚胎氧化应激、保护线粒体功能,促进胚胎的发育,从而提高多次超排小鼠繁殖潜能。
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