对苯二胺氧化产物与DNA相互作用研究

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DNA与小分子之间的相互作用是当前核酸研究的热点之一,它在遗传学,药物设计,药理学等方面有着广泛的应用前景。对苯二胺(PPD)是氧化型染发剂的主要成分,其是否存在危害尚未达成共识。本论文利用了原子力显微镜技术(Atomic force microscopy,AFM)探测DNA与PPD氧化产物之间的相互作用,并借助琼脂糖凝胶电泳,紫外可见分光光度法,质谱法进行辅助分析。从纳米和分子水平上阐述了DNA与PPD氧化产物之间可能的作用机理,预测了二者之间可能存在的结合方式。 1.本论文首次利用AFM观测了不同来源的DNA在加入不同浓度,不同氧化时间PPD时所产生的结构变化。由AFM所得的形貌图结果推测PPD氧化产物能够引起DNA产生凝集现象,DNA分子与PPD氧化产物可能存在静电力作用,这一现象在已知的文献中尚未见到过报导。实验结果为其它关于PPD危险性的研究提供了纳米水平上的依据,并对今后的科学研究提供了一定的参考价值。 2.琼脂糖凝胶电泳发现,随着PPD氧化产物的加入,质粒DNA在4000 bp处荧光明显增强,此现象与AFM相吻合。 3.紫外分光光度计中的光谱结果显示:当DNA加入时,PPD氧化产物的部分谱线产生了减色和红移现象,说明PPD氧化产物中的某种成分与DNA分子之间存在插入嵌合作用。 4.质谱分析表明,PPD氧化产物很复杂,其主要的氧化物为Badrowski’s base(BB,m/z=319.3)。分析液相及薄层色谱分离的产物,得知DNA凝集可能是由BB水溶液引起。 本论文的结果表明,PPD氧化产物之一BB的水溶液与DNA之间存在明显的相互作用,可能会影响DNA正常复制,从而导致遗传疾病。基于此,提倡人们发挥中草药的传统优势,研制出无毒无害的治疗头发疾病的药物和染发剂替代品。
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