水飞蓟宾可过饱和自纳米乳体系的构建及体内外性能稳定机制探讨

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水飞蓟宾(SLB)是一种低水溶性、高脂溶性小分子黄酮类成分,为提高SLB的生物利用度。过饱和是一种常用的制剂手段。脂基药物传递系统(LBFs)被证实可有效提高水难溶性、脂溶性良好药物溶解度的方法。但近年来,大量研究成果显示,ⅢB型和Ⅳ型LBFs具有高的载药量同时,经胃肠溶液分散后会导致过饱和增溶作用的丧失。可通过加入沉淀抑制剂(PPIs)稳定或延长过饱和状态,以提高制剂的效益。本课题拟制备过饱和自纳米乳释药体系(S-SNEDDS),围绕SLB-SSNEDDS制备工艺优化及体内外评价、PPIs在生物介质中维持过饱和稳定的机理进行了一系列工作。本文研究内容主要分为以下4部分:1水飞蓟宾过饱和自纳米乳释药体系的制备及性能评价为开发和优化SLB-SSNEDDS,以提高SLB在生物介质中的过饱和度以及延长过饱和时间。通过溶解度试验、乳化剂乳化能力的考察以及伪三元相图的绘制,优选出SLB-SNEDDS处方组成;采用层次分析法(AHP)综合评价各处方的性能以确定处方最优比例;考察药物在体外生物介质中的过饱和度和持续时间以优选出合适的PPIs及其用量。最终优化得到的处方为Capryol 90∶Cremophor RH∶Transcutol HP(10∶67.5∶22.5),载药量为50.19 mg/g,再辅以2%HPMCAS MF(SLB-SSNEDDS-A)和5%PVPK30(SLB-SSNEDDS-B)。从乳化效果、乳液大小及表面形貌,体外释药及体外过饱和度等性能指标评价SLB-SSNEDDS。经质量评价:SLB-SSNEDDS-A/B形成的乳液均一透明,乳滴呈大小均匀的圆球状分布,乳化时间分别为(30.67±4.16 s)、(25.42±2.98s),平均粒径分别为(11.67±0.81 nm)、(13.11±0.79nm),多分散指数分别为(PDI)为(0.15±0.04)、(0.18±0.03);在2种生物介质中药物的溶出速率均显著升高;体外稀释后,在Fa SSIF-V2体系中SSNEDDS-A在2h内维持的过饱和度稳定在5.5左右,SSNEDDS-B可延长过饱和稳定时间,60min后过饱和度降低;但在Fa SSGF体系中SLB-SSNEDDS-A/B均只能短暂相对延长过饱和。2聚合物维持过饱和稳定性的机理研究为更好的了解聚合物抑制药物过饱和状态下的相变过程,探讨聚合物在生物介质中维持过饱和的可能作用机制。以PVP K30、HPMC、Soluplus和HPMCAS MF为模型聚合物,SLB-SNEDDS为过饱和产生工具,研究聚合物对SLB相变过程的影响。再者从过饱和度(热力学)和晶核形成或生长(动力学)两个角度,探讨聚合物维持过饱和稳定性的机理。结果显示Fa SSGF/Fa SSIF-V2中加入聚合物PVP K30、HPMC、Soluplus和HPMCAS MF后,均表现出不同程度的维持或延长过饱和的能力。在热力学上,Soluplus(Fa SSGF)可增加SLB溶解度,降低过饱和度。在动力学上,聚合物均表现出不同程度的SLB成核和晶体生长抑制作用。Soluplus(Fa SSGF)和HPMCAS MF(Fa SSIF-V2)在2h内的分散过程中未见晶核的形成;其中HPMCAS MF(Fa SSGF)和PVP K30(Fa SSIF-V2)可显著延长成核时间,分别为439s和2306.68s;但HPMC和Soluplus仅具有微弱成核抑制作用。四种聚合物对SLB晶核的生长速率均具有不同程度的抑制作用,其中PVPK30、HPMC和HPMCAS MF对晶核生长的抑制作用最明显;SEM可进一步证实,聚合物的加入可影响晶体的生长习性。从溶液粘度和分子间相互作用力分析SLB结晶动力学差异。然而,聚合物溶液的粘度值几乎一样;仅PVPK30(Fa SSIF-V2)和Soluplus(Fa SSIF-V2)显示出SLB可能产生了某种微弱的相互作用。综上,聚合物溶液粘度和分子间相互作用并不能很好的解释四种聚合物在不同体系中的作用差异。因此,可进一步通过相关实验验证聚合物稳定乳滴形态结构是否可成为一种可能机制。3 Caco-2模型评价自乳化制剂吸收的影响为评价自乳化制剂对细胞毒性及渗透吸收的影响。通过MTT法测定不同处方浓度的浓度Caco-2细胞毒性效应;通过建立Caco-2细胞单层模型评价SLB-SNEDDS和SLB-SSNEDDS A/B的体外膜透性和促吸收作用。结果表明制剂浓度低于2mg/m L(含SLB100?g/m L)对细胞无毒性;加入了2%HPMAS MF和5%PVPK30后,对细胞的存活率无明显影响。转运结果显示,与非制剂组比较,自乳化制剂组的Papp(AP→BL)均具有极显著增加;2%HPMAS MF和5%PVPK30不影响SLB2h内的渗透过程。4水飞蓟宾及其自乳化制剂体内药动学研究为考察SLB自乳化制剂在大鼠体内的药动学行为及生物利用度。通过大鼠灌胃SLB混悬液、SNEDDS及SSNEDDS-A/B(SLB:50mg/kg),根据非房室模型拟合体内药动学参数。结果显示,与SLB混悬液比较,SLB-SNEDDS和SSNEDDS-A/B组血药浓度均有显著的提高,Cmax分别为5.25倍、9.69倍、6.25倍;平均相对生物利用度分别为578.45%、1139.44%、850.11%。与SLB-SNEDDS比较,SLB-SSMEDDS-A/BCmax分别为1.85倍、1.19倍;平均相对生物利用度分别为197%、146.97%。因此,SNEDDS制剂可显著提高SLB的生物利用度;2%HPMCAS MF和5%PVPK30可更好的改善SLB-SNEDDS的胃肠行为,增强SLB吸收,进一步提高SLB的生物利用度。
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