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研究目的:用放射性核素碘-131标记BmK CT并探讨131I-BmK CT对U87细胞增殖能力的影响。研究方法:以间接标记法制备及纯化125I/131I-BmK CT,并对其体外稳定性进行评价。分别采用荧光标记和碘-131标记的BmK CT观察BmK CT的体外靶向性。通过CCK-8、平板克隆实验分析BmK CT及131I-BmK CT对U87细胞的增殖能力的影响。使用流式分析药物处理后的细胞周期及细胞凋亡情况。AO/EB双荧光染色用来评估不同药物对U87细胞的凋亡作用。最后采用western blot实验检测药物处理后的U87细胞内相关凋亡蛋白水平的变化。研究结果:成功制备并纯化125I/131I-BmK CT,其在PBS与血清中稳定性良好。BmK CT具有胶质瘤细胞靶向性,一定浓度下（<1000μg/ml）不影响U87细胞的增殖,而131I-BmK CT可抑制U87细胞增殖,引起细胞周期阻滞,促进细胞发生凋亡。研究发现BmK CT及131I-BmK CT均能引起凋亡相关蛋白发生改变。结论:BmK CT具有U87细胞靶向性,一定浓度下不影响细胞增殖,而131I-BmK CT可抑制U87细胞增殖,促进细胞凋亡。研究目的:研究东亚钳蝎毒素（BmK CT）对人脑胶质瘤U87细胞的增殖及侵袭能力的影响,并对相关机制进行初步探讨。研究方法:通过transwell实验、划痕实验评估BmK CT和131I-BmK CT对U87细胞侵袭及迁移能力的影响。采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）、Western Blot方法检测药物作用前后基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）的蛋白表达及分泌水平的变化。研究结果:Transwell侵袭实验及划痕实验表明BmK CT可降低U87细胞的侵袭、迁移能力（P<0.05）,并且这种作用呈剂量依赖性,BmK CT在较低浓度（5μg/m L）下即可达到明显的抑制效果,而同等浓度下的131I-BmK CT可比BmK CT更好的抑制U87细胞的侵袭及迁移能力（P<0.05）。与PBS对照组相比,BmK CT上调TIMP-2蛋白表达水平（P<0.05）,下调MMP-2和MMP-9蛋白表达水平（P<0.05）,明显减低了分泌到细胞外的MMP-2和MMP-9蛋白（P<0.05）,而胞外的TIMP-2分泌蛋白较PBS对照组高（P<0.05）,但131I-Bmk CT处理组与Bmk CT处理组间无明显差异（P>0.05）。明胶酶实验分析表明Bmk CT可使MMP-2/9蛋白活性减低,这种作用在131I-Bmk CT的处理下更为显著（P<0.05）。结论:BmK CT可能通过上调TIMP-2蛋白表达水平,进而下调MMP-2蛋白表达水平,从而抑制U87细胞的迁移及侵袭能力,131I-Bmk CT抑制能力较BmK CT更强,在抗肿瘤转移中有良好的应用前景。研究目的:通过放射性核素99mTc标记Bm K CT多肽制备靶向胶质瘤的显像剂,探讨99mTc-Bm K CT用于胶质瘤显像的可行性。研究方法:采用Bm K CT多肽游离的氨基与DTPA酸酐反应得到Bm K CT-DTPA,经99mTc标记后通过柱层析分离纯化制备99mTc-Bm K CT。测定标记物在PBS溶液和血清中不同时间点放射性化学纯度,评价99mTc-Bm K CT体外稳定性。新西兰白兔耳缘静脉注射99mTc-Bm K CT进行SPECT显像,观察不同时间点体内的放射性分布。皮下胶质瘤裸鼠经尾静脉注射99mTc-Bm K CT,观察不同时间点肿瘤的摄取情况;注射后4 h处死裸鼠,分离肿瘤和主要器官进行离体SPECT显像,并用勾画感兴趣区法分析相对放射性计数。研究结果:99mTc标记Bm K CT多肽标记率大于80%,经柱层析分离纯化后放射性化学纯度大于99%。标记物在PBS和血清稳定性良好,6 h内放射性化学纯度均大于95%,12 h内放射性化学纯度大于90%。正常白兔SPECT显像表明99mTc-Bm K CT主要浓聚在肝脏、脾脏和肾脏,软组织持续显影微弱,甲状腺区及胃肠未见核素浓聚;显像剂主要通过泌尿系统排泄,24 h肾脏与肝脏显影接近。胶质瘤裸鼠SPECT显像表明,注射后4 h肿瘤显像清楚,ROI分析结果显示肿瘤/肌肉比4.26±0.25,标记物在肿瘤内代谢缓慢,8 h肿瘤部位仍有较高摄取。结论:本研究成功制备了99mTc标记Bm K CT多肽,标记物主要被肝、脾和肾摄取,经泌尿系统排泄;99mTc-Bm K CT能够在皮下胶质瘤中浓聚,注射后4 h肿瘤显影清晰,瘤内代谢缓慢,有潜力成为一种新型胶质瘤分子探针。