【摘 要】
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基于基因芯片技术(Gene chip)和实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative PCR, Real time-qPCR)技术,本文从基因水平对冠心病(Coronary heart disease,CHD)、糖
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基于基因芯片技术(Gene chip)和实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative PCR, Real time-qPCR)技术,本文从基因水平对冠心病(Coronary heart disease,CHD)、糖尿病肾病(Diabetic nephropathy, DN)和乳腺癌(Breast cancer, BC)的病理机制进行了初步研究。首先,采用基因芯片技术研究高血脂冠心病(Hyperlipidemia-CHD, H-CHD)与非高血脂冠心病(Non hyperlipidemia-CHD, NH-CHD)差异基因,筛选得到564个差异基因,对其进行生物信息学分析。基因本体论(Gene Oncology, GO)和通路注释分析发现,有4个显著富集的GO节点涉及脂代谢相关的生物学过程(10.5%),5个显著富集的通路涉及脂代谢相关反应,GO节点分析结合通路分析得到了6个重要的目标基因。从基因水平揭示了冠心病与脂代谢的相关性,目标基因可能为H-CHD和NH-CHD预诊断研究提供新思路。其次,利用实时荧光定量PCR (Real time-qPCR)技术检测3个血流动力学易感基因的表达量,探讨糖肾方(TSF)治疗糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy, DN)患者对易感基因表达量的影响。从给药前DNⅢ期和DNIV期患者到给药后3个月和6个月,肾小球滤过率(Glomerular filtration rate, GFR)和尿微量白蛋白(Microalbuminuria, MALB)水平有所改善,3个基因表达量均具有不断接近正常人水平的趋势,给药6个月的基因表达改善效果优于给药3个月。揭示通过TSF长期调理逐步改善DN患者体内代谢紊乱,缓解其血流动力学异常状况,为中药复方TSF的临床疗效提供了评价指标。最后,建立了乳腺癌(Breast cancer, BC)相关基因表达量的Real time-qPCR检测方法,测定了17例正常人和15例BC患者VEGF、Bcl-2、Cox-2基因的表达量。从分子生物学水平阐述了基因表达变化与BC的相关性,为乳腺癌诊断方法提供新的思路。
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