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目的：利用小分子泛素样修饰蛋白(Small ubiquitin-like modifier, SUMO)融合表达系统,在大肠杆菌Origami B (DE3)中表达人β防御素Ⅱ(human (3 defensin 2, HBD2)与抗Her-2单链抗体(4D5 scFv)的融合蛋白。初步测定其体外抗菌抗肿瘤活性及特异性亲和能力,为日后用于靶向治疗HER2高表达的肿瘤疾病提供研究基础。方法：将编码SUMO和HBD2-4D5的DNA片段克隆到原核表达载体pET-3c中,并转化E.coli Origami B (DE3),抗生素筛选重组子。以终浓度为1 mM IPTG进行诱导表达,通过组氨酸亲和凝胶层析(Ni-NTA sepharose)、特异性蛋白酶(SUMO protease)酶切和分子筛(Sephadex G-25)联用的方法纯化蛋白。琼脂弥散抑菌法检测融合蛋白抑菌活性,MTT法检测融合融合蛋白对乳腺癌细胞的细胞毒性,细胞流式技术检测融合蛋白对乳腺癌细胞周期的影响,细胞免疫荧光检测融合蛋白与HER2蛋白的结合能力。结果：成功构建表达载体pET-3c-sumo-hbd2-4d5 (OB)。20℃,1 mM IPTG诱导24 h后,获得分子量约为41 kDa的融合蛋白SUMO-HBD2-4D5,表达量占菌体可溶性总蛋白的44.2%。通过组氨酸亲和凝胶层析(Ni-NTA sepharose)、特异性蛋白酶(SUMO protease)酶切和分子筛(Sephadex G-25)联用的方法纯化蛋白,可得到纯度大于95%的蛋白HBD2-4D5,最终的率为15 mg/L。融合蛋白对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有明显的抑制作用,对HER2高表达的人乳腺癌细胞株SK-BR-3同样有明显的抑制作用,IC50为103.325μg/ml。同时,HBD2-4D5对HER2受体也有较好的结合能力。结论：在大肠杆菌中高效表达SUMO-HBD2-4D5蛋白,纯化后的HBD2-4D5蛋白得率为15mg/L。体外活性表明,融合蛋白蛋具有较好的抑菌、抗肿瘤活性,并与HER2受体有较好的结合能力