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目的:白血病是血液系统最常见的恶性肿瘤之一,有关白血病发生的确切机制尚未明确,目前最突出的是分化基因学说。该学说认为分化基因突变可以阻止细胞的终末分化,使幼稚细胞堆积导致癌变。由于肿瘤细胞具有低分化、高增殖的特性,因此诱导分化可以使肿瘤从未分化状态重新进入分化轨道,为白血病的治疗提供一个新思路。fes属于src家族,c-fes最早由Snyder和Theilen于1969年从猫肉瘤病毒中分离出来。人类c-fes基因定位于染色体15q25-26,编码分子量为93kD的非受体型酪氨酸激酶（Fes）,c-fes mRNA在初治AML、CML、某些恶性淋巴性疾病、造血干细胞、CD34+原始细胞、血管内皮细胞、中枢神经系统及白血病细胞株如HL-60、KG-1、TF-1、THP-1和U937细胞中均有表达。由于造血干细胞和白血病细胞存在分化受阻,检测到c-fes的表达水平较低。在分化的细胞中,c-fes mRNA的表达仅限于髓系,在成熟淋巴细胞中不表达。另外,随着髓系细胞分化程度的增加,c-fes mRNA表达水平、蛋白水平和激酶活性都会因为粒细胞的分化作用而得以提高。不仅如此,c-fes还参与许多细胞分化信号传导途径。本试验旨在研究不同类型白血病细胞中c-fes mRNA的表达及其与临床预后之间的关系。同时进一步探讨c-fes表达水平与白血病分型的关系及在髓系分化方面的作用,为临床治疗白血病提供帮助。方法:1.研究对象:121例急、慢性白血病患者,其中初治急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）66例,包括M1 4例、M2 26例（AML1/ETO融合基因阳性者8例）、M3 14例（PML/RARα融合基因阳性者9例）、M4 12例、M5 8例、M6 2例;急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）28例,其中L1 6例、L2 20例、L3 2例,慢性粒细胞白血病（chronic myelocytic leukemia,CML）23例,包括慢性期（CML-CP）10例、加速期（CML-AP）6例、急变期（CML-BP）7例,慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者4例。男性患者69例,女性患者52例。正常健康人20例作为对照。2.研究方法:采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（Real time-quantify reverse transcription polymerase chain reaction,RQ-PCR）方法对白血病患者的骨髓和20例正常对照的外周血进行c-fes mRNA水平的检测。通过细胞培养的方法对白血病细胞株HL-60进行传代培养,并用不同浓度的三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）对其进行处理,然后于镜下观察细胞增殖状况;用MTT法观察细胞活性及及生长状况,并绘制生长曲线;应用硝基四氮唑兰（NBT）还原实验观察HL-60细胞的分化情况;采用Wright-Giemsa染色观察细胞形态学变化;用流式细胞仪检测细胞膜上的CD11b的表达情况;用RQ-PCR方法检测实验组与对照组c-fes基因的mRNA的表达水平。结果:1.实时定量PCR显示,AML患者组c-fes mRNA的表达水平明显高于对照组（P<0.001）,ALL患者组c-fes mRNA的表达水平与对照组相比无明显差异（P>0.05）,AML患者组c-fes mRNA的表达水平明显高于ALL患者组,差别具有统计学意义（P<0.001）。说明c-fes基因在AML患者高表达,而在ALL患者中不表达或低水平表达,提示c-fes基因在AML和ALL的鉴别方面可能存在一定的价值。2.CML-CP患者组c-fes mRNA的表达水平明显高于对照组（P<0.01）,CML-AP患者组c-fes mRNA的表达水平高于对照组（P<0.05）,CML-BP患者组c-fes mRNA的表达水平与对照组相比无明显差异（P>0.05）,CML-CP患者组c-fes mRNA高于CML-AP患者组（P<0.05）,CML-CP患者组c-fes mRNA的表达水平明显高于CML-BP患者组（P<0.01）,CML-AP患者组c-fes mRNA的表达水平高于CML-BP患者组（P<0.05）。说明随着疾病的进展,髓系分化能力的下降,c-fes mRNA表达水平也逐渐下降甚至缺失,提示c-fes基因在髓系分化方面具有重要作用。3.c-fes mRNA表达水平高的患者较低表达的患者（非M3患者）化疗后缓解率高,差别具有统计学意义（P<0.05）。提示c-fes基因的表达水平可为临床预后的判断提供帮助。4.低浓度（0.1、0.5、1.0、2.5μmol/L）As2O3对HL-60细胞株具有明显的诱导分化作用,并且存在一定的剂量依赖性和时间依赖性的量效关系。5.经低浓度（0.1、0.5、1.0、2.5μmol/L）As2O3作用后,HL-60细胞形态上趋于成熟分化,体积缩小,核仁不清或消失,核浆比例减小,核形变得不规则,呈现肾形、分叶状等,胞质内空泡明显增多。6.RQ-PCR结果显示,与对照组相比,各试验组细胞中c-fes mRNA的表达有不同程度的上调,并且表达强度与药物浓度有剂量依赖关系。结论:1.c-fes基因在成人AML和部分CML患者中有异常高表达,而在ALL患者低表达或无表达,提示c-fes基因在白血病分型中有一定价值。2.AML患者中c-fes高表达者缓解率高,低表达者缓解率低。提示c-fes可作为判断白血病临床预后的的指标之一。3.CML-CP患者组c-fes mRNA高于CML-AP患者组和CML-BP患者组,CML-AP患者组c-fes mRNA的表达水平高于CML-BP患者组。随着疾病的进展,髓系分化能力的下降,c-fes表达水平也逐渐下降甚至缺失,提示c-fes在细胞分化方面具有重要作用。4.As2O3对HL-60细胞具有明显的诱导分化作用,并且呈现一定的剂量依赖性和时间依赖性的量效关系。5.As2O3诱导HL-60细胞分化过程中,随着细胞分化程度的增加,细胞内c-fes mRNA表达亦逐渐增高,通过某些途径提高c-fes mRNA的表达可促进细胞分化。